Концепция общей иммунной системы слизистых оболочек. Под общей иммунной системой слизистых оболочек подразумевают компоненты специфической защиты, реализуемые на внешних слизистых покровах и функционирующие в известной степени независимо от системной иммунологической реактивности. Эта система включает лимфоидную ткань кишечника (GALT-gut associated lymphoid tissue), лимфоидную ткань бронхов (BALT-bronchus associated lymphoid tissue), иммунокомпетентные клетки глотки, слюннных желез, респираторного тракта, молочной железы и гениталий.
Замечательная особенность иммунной системы слизистых оболочек — наличие больших количеств секреторного IgA, что является уникальной характеристикой слизистых покровов. Сывороточные иммуноглобулины и компоненты также присутствуют на различных слизистых покровах и во внешних секретах, но их роль в обеспечении локального защитного механизма менее существенна.
Суть концепции общности иммунной системы слизистых оболочек состоит в том, что выработка секреторных антител происходит не только в местах антигенного воздействия на слизистый покров, но и в отдаленных секреторных участках. Бронхиальный лимфоэпителий, пейеровы бляшки и другие организованные лимфоидные фолликулы изобилуют антиген-реактивными предшественниками В-клеток, коммитированных, главным образом, к синтезу секреторного IgA. Непосредственное антигенное раздражение — необходимое условие для первоначальной активации и пролиферации таких клеток.
Сенсибилизированные антигеном клетки при повторном контакте с тем же антигеном быстро дифференцируются в IgA-иммунобласты, пролиферирующие и мигрирующие сначала в регионарные лимфоузлы, а затем, через грудной лимфатический проток, в кровеносное русло. Во время нахождения в системе кровообращения эти клетки оседают на слизистых оболочках глаз, глотки, гениталий, слюнных и молочных желез, субэпителиальном участке слизистой оболочки верхнего и нижнего отделов респираторного тракта и в lamina propria кишечника.
Специфическая рециркуляция лимфоцитов, стимулированных в лимфоидной ткани слизистых, объясняется тем, что они имеют на своей поверхности молекулы, которые взаимодействуют со специфическими молекулами, размноженными только на поверхности клеток эндотелия венул лимфоидной ткани слизистых, что обеспечивает избирательную рециркуляцию лимфоцитов.
Здесь репопулировавшие клетки начинают активный синтез специфического секреторного IgA, играющего ведущую роль в функционировании общей иммунной системы слизистых оболочек.
Эта концепция имела многочисленные экспериментальные подтверждения. Было установлено, что клетки пейеровых бляшек кролика при введении их облученным аллогенным реципиентам избирательно распределялись в lamina propria и продуцировали антитела преимущественно класса IgA, тогда как клетки, полученные из периферических лимфоузлов доноров, осуществляли специфический homing в периферических лимфоузлах реципиентов и продуцировали антитела преимущественно класса IgG. Сходные исследования выявили, что homing бронхиальных лимфоцитов у реципиентов происходил в BALT.
Оральная иммунизация защищала лабораторных животных от интраназального заражения PC-вирусом. Интраназальное введение дендритных клеток лошадей, праймированных инактивированным герпесвирусом, приводило к появлению иммунитета у мышей.
Иммунизация мышей аналогичным образом инактивированной вакциной против гриппа сообщала устойчивость к интраназальному заражению. Двукратное введение в желудок мышей цельновирионной инактивированной сорбированной вакцины сопровождалось образованием специфических IgA и IgG в легких. При парентеральном введении вакцины в смывах легких IgA не обнаружены.
Энтеральная иммунизация против респираторно-синцитиальной инфекции индуцировала антитела в респираторном тракте, но полную защиту его обеспечивала интраназальная иммунизация. Однако, несмотря на иммунологическую реакцию отдаленных слизистых, наиболее выраженный иммунный ответ образуется в том месте, где слизистая оболочка непосредственно контактирует с вирусным антигеном. Важность локального антигенного стимулирования была убедительно продемонстрирована в экспериментах с вирусом полиомиелита. Уровень специфических секреторных IgA был максимальным в тех участках кишечника, где происходил непосредственный контакт вирусного антигена со слизистой оболочкой.
Живую вакцину Роковак против рота- и коронавирусных энтеритов новорожденным телятам вводили орально перед приемом молозива. После вакцинации заболеваемость и гибель телят от вирусных энтеритов сократились примерно в 4 раза.
В ряде опытов у животных, вакцинированных интраназально, наблюдали образование местных IgA-антител не только в носоглотке, но также в кишечнике и во влагалище. Однако при перректальной вакцинации в кишечнике появлялись IgA- и IgG-антитела в высоких титрах, но не обнаруживались во влагалище. Эти данные указывают, что для индукции местных IgA-антител во влагалище или кишечнике необходима вакцинация именно через эти органы.
Несмотря на то, что исследования по иммунитету слизистых покровов были сосредоточены в основном на изучении секреторных иммуноглобулинов и их роли в функционировании указанной системы, в ряде исследовательских работ указано на участие факторов клеточного иммунитета и, в первую очередь, Т-лимфоцитов в локальном иммунном ответе. Так, установлена миграция и homing Т-лимфоцитов после их антигенной сенсибилизации, а также показана роль Т-хелперов в регуляции местного IgA-ответа.
Представляют интерес данные интравагинальной иммунизации мышей живой вакциной против герпеса. Развивающийся при этом иммунитет может быть перенесен сингенным животным лимфоцитами генитальных лимфоузлов, но не лимфоцитами других лимфоидных органов иммунизированных доноров. Трансплантированные лимфоциты мигрировали преимущественно в ткани половых органов реципиентов, что свидетельствует о важной роли в местном иммунитете вирусиндуцированных Тц-клеток.
Однако имеются наблюдения, когда не были отмечены различия в защите животных от инфекции несмотря на наличие или отсутствие местных IgA-антител после вакцинации.
Лимфатическая ткань слизистых оболочек это
Непосредственно под мукозным эпителием слизистых оболочек в тесной связи с эпителиальными клетками располагаются лимфоциты пейеровых бляшек кишечника, лимфоидных фолликулов аппендикса, миндалин глотки, лимфоидных фолликулов подслизистого слоя верхних дыхательных путей и бронхов, мочеполового тракта. Все эти лимфоидные скопления получили собирательное название — мукозно-ассоциированная лимфоидная ткань.
Читайте также: Ткань для обтяжки офисного кресла
В лимфоидных тканях, ассоциированных со слизистыми оболочками, проходят все стадии специфического иммунного ответа в тех случаях, когда антиген проникает в организм через слизистые оболочки. В мукозно-ассоциированных лимфоидных тканях активированные В-лимфоциты дифференцируются в плазматические клетки, продуцирующие специфические антитела, относящиеся к классу иммуноглобулинов A (IgA). Иммуноглобулины А, пройдя через эпителиальные клетки, где они присоединяют секреторный компонент, выходят на поверхность слизистых оболочек в форме секреторного иммуноглобулина A (SIgA), который обеспечивает местную антибактериальную и антивирусную защиту.
В качестве одного из периферических органов иммунной системы мукозно-ассоциированная лимфоидная ткань является местом:
1) распознавания антигена,
2) антигензависимой пролиферации и дифференцировки Т- и В-лимфоцитов,
3) активации Т- и В-лимфоцитов,
4) продукции цитокинов,
5) продукции и секреции специфических антител — иммуноглобулинов.
30.Лимфоидная ткань слизистых оболочек.
1.Структуры лимфоидной ткани слизистых оболочек, их общая характеристика:
Слизистая оболочка миндалин покрыта многослойным плоским неороговевающим эпителием, во многих местах, особенно криптах, богато заселён лимфоцитами и лейкоцитами.
2.Строение типичного лимфоидного узелка:
В центре располагается герметивный центр, часто лимфоидные узелки отделены друг от друга прослойками соединительной ткани. Мышечная пластинка слизистой не выражена.
3.Диффузная лимфоидная ткань, межэпителиальные лимфоциты и лимфоциты собственной пластинки:
4.Миндалины, их виды, строение, распределение лимфоцитов и функции:
Виды: трубные, нёбные, глоточные, язычные, гортанные.
Строение: Состоит из складок слизистой, в собственной пластинке находятся лимфоидные узелки. От поверхности вглубь отходят крипты, которые затем делятся на вторичные крипты. Слизистая оболочка миндалин покрыта многослойным плоским неороговевающим эпителием, во многих местах, особенно криптах, богато заселён лимфоцитами и лейкоцитами.
Функции: обезвреживают микробов, образуют лимфоциты.
5.Особенности эпителия нёбной миндалины:
Слизистая оболочка миндалин покрыта многослойным плоским неороговевающим эпителием, во многих местах, особенно криптах, богато заселён лимфоцитами и лейкоцитами. За счёт фагоцитоза лейкоцитов эпителий может частично разрушаться, но затем восстанавливается обратно.
31.Глотка и пищевод.
1.Строение глотки: Выделяют 3 отдела: носовой, ротовой и гортанный.
В носовом отделе слизистая покрыта многорядным реснитчатым эпителием, содержит смешанные железы.
В ротовом и гортанном выстлана многослойным плоским эпителием. В подслизистой -концевые отделы сложных слизистых желёз. Мышечная стенка состоит из внутреннего продольного и наружного кольцевого слоя.
2. Оболочки стенки пищевода; слизистая, её строение и тканевой состав:
Слизистая: эпителий – многослойный плоский неороговевающий, состоит из 20-25 слоёв, плоские клетки содержат немного зёрен кератогиалина. Собственная пластинка образует соединительнотканные сосочки, вдающиеся в эпителий. В ней находятся большие скопления лимфоцитов, превращающиеся в лимфатические узелки; здесь же находятся кардиальные железы пищевода (простые разветвлённые трубчатые железы, концевые отделы из кубического или призматического эпителия, с большим содержанием эндокринных клеток). Мышечная пластинка состоит из расположенных вдоль пищевода пучков гладких мышечных клеток, окружённых сетью эластических волокон.
Подслизистая вместе со слизистой образует складки, расправляющиеся при глотании пищи. Содержит собственные железы пищевода.
Мышечная оболочка состоит из внутреннего циркулярного и наружного продольного слоёв. В верхней 1/3 пищевода ткань поперечнополосатая, в средней – и такая, и такая, в нижней – только гладкая.
Адвентиция связана с прослойками соединительной ткани в мышечной оболочке, а с другой стороны – с соединительной тканью средостения. Брюшной отдел покрыт серозной оболочкой.
Лимфатическая ткань слизистых оболочек это
Cтатьи. Работа с контентом
Поиск
Лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми, и поражение поверхности глаза
Лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми (MALT), находится в наружных и внутренних эпителиальных покровах организма. Главной задачей MALT поверхности глаза является сохранение необходимого равновесия между воспалительной иммунной реакцией на патогенные агенты и толерантностью на непатогенные факторы, предотвращая, таким образом, развитие постоянной воспалительной реакции. Различные заболевания поверхности глаза (воспаление, синдром сухого глаза, аллергические заболевания, травма при трансплантации роговицы) опосредуется MALT. Назначение иммуносупрессивной терапии должно оказаться эффективным в лечении этих процессов.
Mucosa-associated lymphoid tissue and the defeat of ocular surface
Mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) is located at mucosal surfaces of the body. It recognizes antigens, generates specific effector cells and provides the mucosal organs with such cells. A basic function of MALT is the immune regulation at mucosal surfaces by balancing between an inflammatory immune defence of pathogens and a tolerance of the ubiquitous non-pathogenic antigens. Various diseases (inflammation, dry eye, chronic allergic, injury in the transplantation of cornea) of the ocular surface include an immune mediated inflammation with production of cytokines, chemokines, adhesion molecules and action of lymphocytes. MALT plays an important role in the immune response during corneal graft rejection and is the main target of immunomodulatory therapy.
Глазная поверхность представляет собой единую анатомическую и функциональную систему, главной задачей которой является защита глаза и адекватное реагирование на факторы внешней среды. Она включает слезные железы (основные и добавочные), роговицу, конъюнктиву глазного яблока и век, слезоотводящие пути.
Поверхность глаза омывается слезой, имеющей несколько слоев (липидный, водный, муциновый). Эти слои продуцируются различными клетками (основная слезная железа, добавочные слезные железы, мейбомиевые железы и бокаловидные клетки и др.) и каждый слой выполняет свою функцию.
Липидный слой является самым поверхностным и препятствует испарению глубжележащих слоев. Он состоит из полярных липидов, находящихся в зоне раздела липиды-вода, и неполярных липидов, находящихся в зоне липиды-воздух. Муциновый слой непосредственно контактирует с эпителиальными клетками и состоит из свободного муцина и гликокаликса, трансмембранного муцина, заякоренного в эпителиальных клетках. Свободный муцин, гликокаликс и вода формируют гель, выполняющий защитную функцию. Именно этот гель препятствует адгезии воспалительных клеток, бактерий (инфекционных факторов), детрита клеток к глазной поверхности.
Читайте также: По своим свойствам ткани различны
Водная составляющая слезы представляет самую объемную часть слезной пленки. Она занимает промежуточное положение между липидным и муциновым слоями, продуцируется основной и добавочными слезными железами.
Слеза выполняет рефракционную, трофическую, увлажняющую и защитную функции. Слезный аппарат поддерживает должное структурное и функциональное состояние эпителия поверхности глаза посредством сенсорного (афферентного) нервного звена и эфферентного нервного звена, отвечающего непосредственно за образование и выделение слезы (его объема и состава). Некоторые находящиеся в слезе протеины (иммуноглобулин А, лактоферрин, лизоцим, пероксидаза) помогают противостоять бактериальным и вирусным инфекциям.
В последние годы благодаря интенсивному изучению лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистыми, стало очевидным ее участие во всех реакциях, протекающих в слизистых оболочках. К поверхности глаза это имеет непосредственное отношение.
Лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками (мукоза ассоциированная лимфоидная ткань — MALT) относится к периферическим отделам органов иммунной системы. В нее входят все системы, имеющие эпителий:
l лимфоидная ткань, ассоциированная с желудочно-кишечным трактом;
l лимфоидная ткань, ассоциированная с бронхами;
l лимфоидная ткань, ассоциированная с урогенитальным трактом;
l лимфоидная ткань, ассоциированная с поверхностью глаза.
Таким образом, защита всех внутренних и наружных эпителиальных покровов организма осуществляется с помощью MALT.
В свою очередь MALT поверхности глаза включает [1]:
l лимфоидная ткань, связанная со слезной железой;
l лимфоидная ткань, связанная с конъюнктивой;
l лимфоидная ткань, связанная со слезоотводящими путями.
В английской литературе MALT поверхности глаза называется глаз-ассоциированная лимфоидная ткань (eye-associated lymphoid tissue -EALT), что неверно, поскольку MALT является составной часть именно поверхности глаза (роговица, конъюнктива). Сам глаз, не имея лимфоидного дренажа, но обладая гемоофтальмическим барьером, в зависимости от локализации воспалительного процесса (передний увеит, срединный увеит, задний увеит, генерализованный увеит) развивает воспалительный процесс посредством других типов иммунологического реагирования.
Главной задачей MALT поверхности глаза является сохранение необходимого равновесия между воспалительной иммунной реакцией на патогенные агенты и толерантностью на непатогенные факторы, предотвращая, таким образом, развитие постоянной воспалительной реакции, т.е. в одних условиях MALT обеспечивает провоспалительную реакцию, в других антивоспалительную, и это важно, потому что ранее все эффекты MALT рассматривались как провоспалительные. Таким образом, все процессы, происходящие на поверхности глаза (воспалительные, дистрофические, синдром сухого глаза, отторжение трансплантата роговицы и др.), опосредуются MALT.
Как же эта система работает? Для того чтобы это понять, необходимо разобраться в организации MALT. Лимфоидная ткань, связанная со слизистой глаза разделяется на диффузную и организованную [2]. В организованной MALT клетки упорядочены и напоминают фолликул, потому ее еще называют фолликулярной тканью. В диффузной MALT клетки не имеют таких скоплений. Но вне зависимости от структуры MALT в ней обязательно присутствуют два листа: эпителий и подлежащая собственная ткань.
Поверхностный лист состоит из многослойного эпителия, клетки которого прочно связаны между собой. Апикальная часть клеток содержит плотный контакт (tight junction complex). Он препятствует вхождению в эти клетки различных агентов, в том числе и патогенных. Нарушение этой целостности может являться как причиной, так и следствием различных процессов, разыгрывающихся на поверхности глаза.
Эпителий отделен базальной мембраной от подлежащей собственной оболочки (lamina propria), состоящей из свободной соединительной ткани. Собственная оболочка богато васкуляризирована. Помимо кровеносных сосудов она содержит и афферентные лимфатические сосуды.
В собственной оболочке имеются фиксированные клетки (фибробласты), отвечающие за продукцию компонентов соединительной ткани и свободные клетки (Т- и В-лимфоциты, плазматические клетки, макрофаги, дендритные клетки, эозинофилы, тучные клетки), которые могут мигрировать в собственную ткань или из нее и осуществлять защитную функцию. Собственная ткань позволяет клеткам взаимодействовать друг с другом и с внеклеточным матриксом посредством различных активных молекул (цитокины, хемокины и молекулы адгезии). В диффузной MALT лимфоидные клетки присутствуют в обоих слоях, в организованной MALT — в собственной оболочке. Заселение MALT происходит из центральных органов иммунной системы (костный мозг и тимус) и участвуют в этом хоминговые молекулы.
Фолликулярная MALT cостоит из двух зон. Центральную зону фолликула образуют В-лимфоциты, по бокам от них располагаются Т-клетки. Такое соседство клеточных элементов определяется тем, что большинство антигенов, попадающих в организм, Т-зависимые, т.е. для полноценного иммунного ответа В-клеток нужна помощь Т-клеток. Эпителий, расположенный над фолликулом, осуществляет транспорт антигена к фолликулу. Фолликул следует рассматривать как афферентное звено MALT. Антиген проникает в фолликул посредством фолликул-ассоциированного эпителия и с помощью антигенпрезентирующих клеток представляется наивным Т-клеткам расположенным парафолликулярно. Это приводит к активации, пролиферации и дифференциации клеток в эффекторные Т- и В-линии (В клеток в фолликуле, и Т-клеток парафолликулярно). Контакт с антигеном в фолликулах приводит к трансформации первичных фолликулов во вторичные с появлением центров размножения пролиферирующих В-клеток. Фолликулы локализуются в тарзо-орбитальной зоне и в 80% располагаются симметрично в обоих глазах.
Читайте также: Ткань оксфорд с полиуретановым покрытием
Помимо местной реакции антиген может транспортироваться с помощью антигенпрезентирующих клеток по афферентным лимфатическим сосудам в региональные лимфатические узлы, где происходит пролиферация и дифференциация клеток в эффекторные Т- и В-линии. В конце концов благодаря рециркуляции они попадают в сосудистую систему и заселяют эти же или другие слизистые уже как эффекторные клетки (Т-клетки, плазматические клетки). Вот почему на один и тот же антиген может развиться как реакция на поверхности глаз, так и дыхательных путей и др.
Диффузная лимфоидная ткань представляет собой эфферентное звено MALT, так как заселена эффекторными клетками [3]. Т-лимфоциты дифференцируются в CD8+супрессорные/цитотоксические и обеспечивают или толерантность к непатогенным антигенам или обезвреживают патогенные агенты.
В-клетки превращаются в плазматические клетки и продуцируют IgA. В противоположность системному иммунитету, плазматические клетки слизистых транспортируют полимерную форму иммуноглобулинов на поверхность слизистой ткани посредством секреторного компонента. Эти иммуноглобулины осуществляют защитную роль на поверхности конъюнктивы глаза.
Таким образом, В-лимфоциты составляют большую часть клеток организованной MALT (фолликулов). В диффузной лимфоидной ткани В-лимфоциты редки и преобладают Т-лимфоциты, из них CD8+ супрессоры/цитотоксические клетки встречаются чаще, чем CD4+ Т-клетки. Последние отвечают за дифференциацию Т- и В-клеток. CD8+Т-клетки носят на своей поверхности человеческий мукоза-лимфоцитарный антиген (the human mucosa lymphocyte antigen — HML-1). Эти клетки выполняют функции подавления иммунных реакций на непатогенные антигены, отвечая в большей степени за толерантность, а не за воспаление [4, 5]. Однако на патогенные агенты они могут опосредовать воспалительную реакцию. Антиген представляется наивным Т-клеткам профессиональными антигенпрезентирующими клетками, к которым относятся макрофаги, В-клетки и дендритные клетки, которые обязательно имеются в MALT системе поверхности глаза.
Главными антигенпрезентирующими клетками MALT являются дендритные клетки. Только дендритные клетки, ведущие свое начало из костного мозга, способны напрямую активировать Т-лимфоциты [6]. Не следует забывать, что продукция имммуноглобулинов также зависит от Т-клеток, поэтому В-зоны лимфоцитов всегда находятся в соседстве с Т-зонами. В зависимости от внешних стимулов в слизистой (цитокины, микробы, клеточный детрит, непатогенные факторы и др.) функция дендритных клеток различна и может вести к стимуляции разных типов Т-хелперов, которые в свою очередь разворачивают разные типы реагирования. Th1-лимфоциты отвечают за Т-клеточный тип воспалительных реакций, Th2 — гуморальный и Th3 (Treg) — иммуносупрессию.
Дендритные клетки находятся в эпителии и в собственной слое MALT, однако среди них преобладают незрелые клетки. Они способны поглощать антиген, но вследствие отсутствия экспрессии на их клеточной мембране HLA II класса и костимулирующих молекул, не могут представлять эти антигены Т-лимфоцитам. В данном случае ими продуцируются противовоспалительные цитокины, главным из которых является IL-10. Контакт таких дендритных клеток с Т-лимфоцитами подавляет Т-клеточно-опосредованные реакции (возникает иммуносупрессия и толерантность Т-клеток).
Сигналы, способствующие созреванию дендритных клеток, возникают при нефизиологических условиях. Нарушение целостности ткани (контакт с микробными организмами, воспалительными цитокинами, трансплантационная хирургия, синдром сухого глаза, аллергия и др.) вызывает появление «сигналов опасности». Тогда на дендритных клетках экспрессируются HLA II класса и костимулирующие молекулы (CD80, CD86, CD40) [7]. Это позволяет представить антиген Т-клеткам со смещением иммунного ответа в сторону Th1 типа и продукцией провоспалительных цитокинов (IL-2, IFN-y, TNF-a).
Появление цитокинов приводит к еще большей активации лимфоцитов посредством молекул адгезии, вследствие чего активируются стромальные клетки, высвобождаются металлопротеиназы, которые вызывают дегенеративное ремоделирование экстрацеллюлярного матрикса вокруг эпителиальных клеток.
Факторы пролиферации, такие как (EGF, HGF) также могут нарушаться. Вследствие этого наблюдается гиперпролиферация конъюнктивального эпителия одновременно с нарушением его дифференциации. Конъюнктивальный эпителий у больных с сухим глазом обнаруживает незрелый фенотип апикальных клеток, кератинизацию базальных клеток и отсутствие интегрального муцина на поверхности эпителиальных клеток.
В противоположность конъюнктиве и краевой зоне роговице, где дендритные клетки относительно часто экспрессируют HLA I или II класса, в центральных отделах роговицы дендритные клетки не имеют на своей поверхности этих антигенов, а значит, не могут представлять и чужеродные антигены. Только вследствие воспаления или васкуляризации роговицы возможна эксспрессия антигенов гистосовместимости на поверхности дендритной клетки. В таком случае дендритные клетки, находящиеся в центре роговицы, получают возможность представлять антигены и активировать Т-лимфоциты. Это ведет к отторжению роговичного трансплантата. При отсутствии воспаления или неоваскуляризации роговицы отторжение трансплантата наступает значимо реже, чем других органов (почек, кожи или сердца).
Таким образом, поверхность глаза представляет собой уникальный аппарат, который посредством взаимодействия различных компонентов в физиологических условиях обеспечивает целостность системы и нереагирование на непатогенные факторы. При нарушении этой целостности в силу различных причин развивается каскад реакций, приводящих к воспалению, а оно в свою очередь вызывает еще большее нарушение целостности этой системы.
Назначение иммуносупрессивной терапии должно оказаться эффективным в лечении этих процессов.
Н.А. Ермакова
Эндокринологический диспансер Департамента здравоохранения города Москвы
Ермакова Надежда Алексеевна — доктор медицинских наук, профессор, врач-офтальмолог
1. Knop E., Knop N., Pleyer U. Clinical Aspects of MALT // Uveitis and Immunological Disorders. — Springer. — 2005. — Р. 67-68.
2. Knop N., Knop E. Conjunctiva-associated lymphoid tissue in the human eye // Invest Ophthalmol Vis Sci. — 2000. — V. 41. — P. 1270-1279.