ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ — методы изучения химических свойств тканей и выявления особенностей обмена веществ в тканевых структурах.
Г. м. и. делят на разрушающие и неразрушающие. Неразрушающие методы требуют соблюдения определенных физ. констант (кристаллографические характеристики, электромагнитные лучи, люминесценция и т. п.) и хим. показателей (in vivo, после холодной промывки, фиксации и реакции). К разрушающим методам относят растворение, распыление, микровозгонку, гистоспектрографию, экстракцию с энзимами и другими реагентами, гистопиролизис и др. Кроме того, существуют так наз. методы разделения, к к-рым относят микрозонд, микротомные срезы, экстракцию с растворителями, дифференциальное центрифугирование с использованием микрогравиметрической, калориметрической, полярографической, радиометрической и микробиол, техники. Важнейшим свойством большинства Г. м. и. является возможность дифференцировать тканевые (клеточные) хим. компоненты, основываясь на их различном сродстве к красящим веществам и взаимодействии красителей или хим. реагентов со специфическими группировками белков, полисахаридов, жиров, ферментов и т. д. (цветн. рис. 1—4).
Для проведения гистохим, исследований необходима строгая прижизненная локализация искомого хим. соединения, что возможно лишь при сохранении структуры тканей и клеток в состоянии, близком к тому, к-рое имеется в живом организме. Это достигается получением срезов свежезамороженных тканей с помощью ножа глубокого охлаждения и криостата. Каждый метод должен быть специфичным, т. е. избирательно выявлять группу определенный веществ или определенное хим. вещество, а также высокочувствительным.
Результаты гистохим, исследования могут оцениваться качественно и количественно. Качественная оценка реакции основывается на выявлении характерной окраски искомого вещества (гистохим, реакции), типичного распределения ферментных гранул (гистоферментохим. реакции), специфического свечения (иммуногистохим. реакции), для чего пользуются световым или люминесцентным микроскопами. Возможно сочетание гисто(цито)хим. метода с электронно-микроскопическим (см. Электронная микроскопия). Для количественной оценки гистохим, реакции пользуются методами цитофотометрии (см.), авторадиографии (см.).
Г. м. и. применяют для определения различных тканевых (клеточных) хим. компонентов, напр, белков, витаминов, гормонов, пигментов и др.
Для гистохим, определения белков применяют ряд методов, выявляющих аминокислоты, входящие в их состав (см. Белки, гистохимические методы выявления в тканях). В основе выявления нуклеиновых к-т лежат реакции на все компоненты, которые образуются в результате их гидролиза (фосфорная к-та, пуриновые, пиримидиновые основания, углеводы). Нуклеиновые к-ты существуют в различных формах — РНК и ДНК (см. Дезоксирибонуклеиновые кислоты, гистохимические методы определения в тканях, Рибонуклеиновые кислоты, гистохимические методы определения в тканях).
При гистохим, выявлении специфических белков — ферментов, которые играют роль биол, катализаторов, учитывают их термостабильность (оптимум действия 37—40°), высокую чувствительность к изменению среды, выраженную специфичность действия (см. Ферменты, гистохимические методы определения в тканях). Методы выявления липолитических ферментов (липаз и эстераз) основаны на их способности расщеплять эфиры жирных к-т. Липазы и эстеразы относятся к группе карбоновых эстераз и расщепляют многочисленные алифатические и ароматические эфиры карбоновых к-т (см. Липазы, гистохимические методы определения в тканях; Эстеразы, гистохимические методы определения в тканях).
Большую группу ферментов, катализирующих окислительно-восстановительные процессы, составляют дегидрогеназы (см. Дегидрогеназы, гистохимические методы определения в тканях). Дыхательные ферменты, содержащие железо, относятся к цитохромам, которые в зависимости от природы гемопростетической группы делятся на Цитохромы А, В и С (см. Цитохромы, гистохимические методы определения цитохромоксидазы). В животных тканях после обработки их водными фиксаторами и заливки в парафин выявляется единственный представитель группы полисахаридов — гликоген (см. Гликоген, гистохимические методы определения в тканях). Для обнаружения полисахаридного и белкового комплексов гликопротеидов, которые являются сложными белками, используют ряд Г. м. и. (см. Гликопротеиды, гистохимические методы определения в тканях). Муцины в тканях определяются с помощью альцианового синего и др. (см. Муцин, гистохимические методы определения в тканях). Выявление липидов (см. Липиды, гистохимические методы определения в тканях) основано на растворении инертных бис-азосоединений или других красителей в самих жирах.
Читайте также: Резец колесико для ткани
Для гистохим, выявления липопротеидов применяют те же методы, что и для определения белков (см. Липопротеиды, гистохимические методы определения в тканях). Методы определения гормонов основаны на хим. взаимодействии их реактивных групп (белков, полисахаридов, жиров) с различными хим. веществами (см. Гормоны, гистохимические методы определения в тканях). Для выявления витаминов используют ряд специфических методик (см. Витамины, гистохимические методы определения в тканях). Г. м. и. пигментов зависят от наличия определенных, входящих в их состав, групп (см. Пигменты, гистохимические методы определения в тканях).
Г. м. и. находят широкое применение в эмбриологии и гистологии, цитологии, патологической анатомии, экспериментальной и клин, патологии для решения как теоретических, так и практических задач.
С помощью разнообразных методов современной гистохимии можно судить не только об особенностях хим. реакций различных тканевых структур, но и определять характер и темп обмена в тканях и клетках, а главное специфику функций, специализированных структур, что позволяет изучать самые ранние (функциональные) проявления многих заболеваний.
Библиография Берстон М. Гистохимия ферментов, пер. с англ., М., 1965; Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия, пер. с англ., М., 1969; П и р с Э. Гистохимия, пер. с англ., М., 1962; Принципы и методы гисто-цитохимического анализа в патологии, под ред. А. П. Авцына и др., Л., 1971; Akzessori-sche Methoden in der Histochemie, hrsg. v. G. Geyer u. H. Luppa, Jena, 1975; Gewebe-vorbehandlung und Fixation in der Histo-chemie-Probleme biologischer Farbstoffe, hrsg. y. D. Wittekind, Jena, 1973; K i!s-z e 1 y G. u. P o s a 1 a k y Z. Mikrotech-nische und histochemische Untersuchungs-methoden, Budapest, 1964.
3.Паренхиматозные жировые дистрофии органов(миокард,печень, почки). Причины, патогенез, морфологическая характеристика, исходы. Гистохимические методы выяления липидов.
Макро-вид органов 1.глинисто-желтый цвет 2.тусклый вид 3.дряблая консистенция
Гисто-хим методы выявл-ия жира в кл-ках 1.судан-III в красный цвет 2.судан-IV и осмиевая кислота в черный 3.сульфат нильского голубого окрашивает жирные кислоты в темно- синий цвет, нейтральные жиры в красный.
Мех-м развития ЖД в почке –инфильтрация. Появление жиров в эпителии проксимальных и дистальных канальцев.
Внешний вид- увеличены, дряблые, корковое вещество набухшее, серое с желтым крапом.
Механизм развития- инфильтрация эпителия почечных канальцев жиром при липемии и гиперхолестиринемии, что ведет к гибели нефроцитов.
Мех-м развития ЖД в миокарде –инфильтрация и декомпозиция. Появление в миоцитах жировых капель (пылевидное ожирение). Затем мелкокапельное ожирение полностью занимает цитоплазму. Митохондрии распадаются, поперечная исчерченность исчезает. Процесс очаговый.
Читайте также: Ткани для пэчворк в новосибирске
Внешний вид- зависит от степени жировой дистрофии.Если сильно выраженный процесс- сердце увеличено в объеме, камеры растянуты, дряблой консистенции, на разрезе глинисто- желтый. Со стороны эндокарда «тигровое сердце».
Механизмы развития ЖД- повышенное поступление жирных кислот в кардиомиоциты, нарушение обмена жиров в этих клетках, распад липопротеидных комплексов внутриклеточный структур.
Механизм развития ЖД в печени. Увеличение жиров в гепатоцитах. Сначала пылевидное ожирение, затем мелкокапельное ожирение, крупнокапельное ожирение.
Внешний вид- увеличена, дряблая, охряно- желтая. При разрезе остается налет жира.
Механизм развития ЖД- чрезмерное поступление жирных кислот в гепатоциты или повышенный их синтез, воздействие токсических веществ, блокирующих окисление жирных кислот и синтез ЛП в гепатоцитах, недостаточный синтез ФЛ и ЛП. (липопротеидемия- алкоголизм, СД, общее ожирение; гепатотропные интоксикации — этанол, фосфор, хлороформ; нарушения питания.
Причины 1.тканевая гипоксия 2.инф-ции( дифтерия, туберкулез, сепсис) 3.интокс-ции (фосфор, мышьяк, хлороформ). 4.авитаминозы 5.безбелковое пит-ие
Исходы -обратима (при отсутствии грубого полома стр-р) или гибель кл-к.
Функциональное знач-ие -резкое наруш-ие ф-ций
Стромально-сосудистые жировые дистрофии. Общее ожирение(тучность) и липоматозы. Классификация, причины, механизмы развития, морфология, значение для организма.
Стромально- сосудистые (мезенхимальные) дистрофии разиваются в результате нарушений обмена в соединительной ткани и выявляются в строме органов и стенках сосудов. (гистион- отрезок микроциркуляторного русла с окружающими его элементами соединительной ткани.
Стромально- сосудистые жировые дистрофии- возникают при нарушениях обмена лабильного жира (нейтральных жиров) или холестерина и его эфиров.
Ожирение, или тучность– увеличение количества нейтральных жиров в жировых депо. Оно носит общий характер и выражается в избыточном отложении жиров в подкожной клетчатке, сальнике, брыжейке кишечника, средостении, эпикарде. Появление жировой ткани где она в норме отсутствует.
первичное (идиопатическое) ожирение- причина неизвестна; вторичное ожирение.
Виды вторичного ожирения: алиментарное (несбалансированное питание и гиподинамия); церебральное (при опухолях мозга, особенно гипоталамуса, некоторых нейротропных инфекциях); эндокринное (синдром Иценко-Кушинга, адипозо-генитальная дистрофия, гипотиреоз, гипогонадизм); наследственное (болезнь Гирке).
По внешним проявлениям различают универсальный, или симметричный тип ожирения, который делят на три подтипа: верхний; средний; нижний типы ожирения.
По числу и размеру адипоцитов( морфология) выделяют два варианта: гипертрофический; гиперпластический. При гипертрофическом варианте ожирения число адипозоцитов не изменяется, но жировые клетки многократно увеличены в объеме за счет избыточного содержания в них триглицеридов. Клиническое течение заболевания злокачественное.
При гиперпластическом варианте число адипозоцитов увеличено. Однако, метаболические изменения в них отсутствуют. Течение болезни доброкачественное.
При тучности большое клиническое значение имеет ожирение сердца. Жировая ткань разрастается под эпикардом и прорастает между мышечными пучками, сдавливая их и охватывая сердце в виде футляра, что приводит к замещению миокарда жировой тканью, в связи с чем может произойти разрыв сердца.
Причины и механизмы развития Несбалансированное питание и гиподинамия, нарушения ЦНС и эндокринной регуляции жирового обмена, наследственные факторы. Механизм- нарушение равновесия липогенеза и липолиза в жировой клетке в пользу липогенеза.
Значение тяжелые осложнения.
Читайте также: Цветы из ткани лентами
Исход общего ожирения редко бывает благоприятным. Общее ожирение определяет развитие тяжелых осложнений. Наиболее частыми причинами смерти при ожирении являются инфаркт миокарда и инсульт.
Местное увеличение количества жировой клетчатки обозначается термином липоматоз. 1)Примером липоматоза может служить болезнь Деркума. Она характеризуется появлением в подкожной клетчатке конечностей и туловища узловатых болезненных отложений жира, напоминающих по внешнему виду на липомы. Причиной этого заболевания являются эндокринные нарушения. 2) вакатное ожирение— замещение жировой клетчаткой атрофированных паренхиматозных элементов. Это часто бывает в вилочковой железе при возрастной инволюции, в других органах при атрофии, жировое замещение почки.
5. Мукоидное и фибриноидное набухание.(стромально- сосудистые диспротеинозы). Причины, механизмы развития, морфологическая характеристика, методы гистохимического выявления.
Мукоидное набухание— поверхностная и обратимая дезорганизация соединительной ткани. увеличение количества и перераспределение мукополисахаридов, преимущественно гликозаминогликанов, в основном веществе соединительной ткани, прежде всего гиалуроновой кислоты. Накопление гликозаминогликанов всегда начинается с повреждения сосудов микроциркуляторного русла, что ведет к развитию тканевой гипоксии. Гликозаминогликаны обладают выраженными гидрофильными свойствами, что на фоне повышенной сосудисто-тканевой проницаемости ведет к выраженной набуханию основного вещества соединительной ткани. Микроскопически коллагеновые волокна обычно сохраняют пучковое строение, но набухают и разволокняются. это приводит к тому, что клетки соединительной ткани удаляются друг от друга.
Для выявления гликозаминогликанов используются специальные окраски: толуидиновый синий, который придает гликозаминогликанам сиреневый или пурпурный цвет. Возникает феномен метахромазии- изменение состояния основного межуточного вещества с накоплением хромотропных веществ. Макроскопически органы практически не изменены.
Локализация. Мукоидное набухание развивается чаще всего в стенках артерий, сердечных клапанах, эндо- и эпикарде, в капсулах суставов.
Причины 1.гипоксия 2.инф-ции 3.имм-Pt р-ции
Исходы 1.полное восст-ие ткани 2.переход в фибриноидное набух-ие.
Функциональное знач-ие-наруш-ие ф-ций. Функция органов страдает.
Фибриноидное набухание – глубокая и необратимая дезорганизация соединительной ткани, в основе которой лежит распад белка и деполимеризация гликозаминогликанов, что ведет к деструкции ее основного вещества и волокон, сопровождающейся резким повышением сосудистой проницаемости и образованием фибриноида. Фибриноид – это вещество, образованное за счет белков и полисахаридов, распадающихся коллагеновых волокон и основного вещества, а также плазменных белков крови и нуклеопротеидов разрушенных клеток соединительной ткани. Обязательным компонентом фибриноида является фибрин.
Микроскопически пучки коллагеновых волокон становятся гомогенными, эозинофильными, резко ШИК-позитивными., образуя с фибрином прочные соединения. Пирофуксин- желтый цвет.Аргирофильны при импрегнации солями серебра.
Макроскопически органы и ткани, в которых развивается фибриноидное набухание, мало изменены. Фибриноидное набухание носит либо системный (распространенный), либо локальный (местный) характер.
Причины инф- алл.(фибриноид сосудов при туберкулезе с гиперергическими реакциями, аллеригические, аутоиммунные( фибриноидные изменения ст пр ревматических болезнях, капилляров почечных клубочков), ангионевротическиет реакции( фибриноид артериол при ГБ И АГ). Местно- при воспалении (фибриноид в аппендиксе при аппендиците, в дне хронической язвы желудка, трофических язв кожи).
В исходе фибриноидного набухания иногда развивается фибриноидный некроз, характеризующийся полной деструкцией соединительной ткани. В дальнейшем происходит замещение рубцовой соединительной тканью (склероз) или гиалинозом. Фибриноидное набухание ведет к нарушению, а нередко и прекращению функции органа.
- Свежие записи
- Балкон в многоквартирном доме: является ли он общедомовым имуществом?
- Штраф за остекление балкона в 2022: что это и как избежать наказания
- Штраф за мусор с балкона: сколько заплатить за выбрасывание окурков
- Оформление балконного окна: выбираем шторы из органзы
- Как выбрать идеальные шторы для маленькой кухни с балконом