Цитогенетическое исследование (кариотип) хориона — хорион биопсия, 1 эмбрион
Описание
Цитогенетическое исследование (кариотип) хориона — хорион биопсия, 1 эмбрион — исследование, заключающееся в получении ворсин хориона для последующего исследования. Данный анализ позволяет выявить тяжёлые патологии развития плода на ранних сроках беременности. Он позволяет диагностировать риск хромосомных и генетических заболеваний.
Наиболее распространённой хромосомной патологией является трисомия (три хромосомы вместо двух в норме) по 21-й хромосоме, или синдром Дауна. Возможно рождение живых детей с трисомиями по хромосоме 13 (синдром Патау), хромосоме 18 (синдром Эдвардса). Эти хромосомные болезни характеризуются еще более тяжёлыми, чем при синдроме Дауна, пороками умственного и физического развития. Как правило, такие дети не живут более года.
Биопсия хориона
Биопсия хориона являет собой взятие образца материала непосредственно из плаценты для дальнейшего его исследования с целью определения кариотипа плода. Кариотип — это полный хромосомный набор клетки человека.
Хорион образует слой клеток на внешней стороне родового пузыря, которые обычно содержат тот же хромосомный материал, что и будущий ребенок. Из клеток хориона состоит детская часть плаценты. Ткань на поверхности хориона имеет небольшие пальцеобразные выступы — так называемые ворсинки.
Оптимальными для проведения анализа считаются 11–12 неделя беременности. Позже не рекомендуется, потому что уже на 13 неделе хорион образует детское место.
- возраст беременной 35 лет и старше;
- наличие в семье ребёнка или выявление при предыдущих беременностях плода с синдромом Дауна или другими хромосомными болезнями;
- наличие в семье ребёнка с множественными врождёнными пороками развития;
- аномалии кариотипа у родителей;
- наличие биохимических и/или ультразвуковых маркёров хромосомных болезней или врождённых пороков развития у плода.
Подготовка
Условия подготовки к анализу определяются лечащим врачом.
Перед хорионбиопсией проводят УЗИ для уточнения срока беременности, наличия сердцебиения плода, локализации хориона, длины цервикального канала, состояния тонуса матки. Производят стандартную обработку операционного поля.
Перед проведением процедуры пациентку информируют о показаниях, технике выполнения, возможном риске хорионбиопсии, получают информированное согласие на её проведение.
Определение кариотипа по ткани хориона цитогенетическим методом
Клетки ворсинчатого хориона (плаценты), доступные для цитогенетического анализа, имеют различное происхождение:
— клетки цитотрофобласта, дифференциация которого происходитна стадии морулы;
— клетки мезенхимы, которые дифференцируются из внутренней клеточной массы зародыша на стадии бластоцисты.
Для хромосомного анализа по клеткам хориона или плаценты используют два основных метода.
1. Длительное культивирование в монослойной культуре. Как и в случае анализа клеток АЖ, существует большое число модификаций культивирования клеток ворсин хориона. Подробнее ознакомиться с ними можно в соответствующей литературе. Отметим лишь, что растущие первичные культуры имеют гетерогенный клеточный состав с преимущественным ростом фибробластоподобных клеток мезенхимальной стромы ворсин. Образование колоний или рыхлого монослоя обычно происходит к 10- 12-му дню культивирования. Основные принципы анализа культур клеток ворсин хориона и интерпретации результатов аналогичны таковым для культур клеток АЖ.
2. «Прямые» препараты ворсин хориона. Метод анализа «прямых» препаратов базируется на исследовании спонтанно делящихся клеток цитотрофобласта без их предварительного культивирования. Впервые препараты из ворсинчатой ткани хориона, содержащие метафазные пластинки удовлетворительного качества, без использования культуры клеток были получены группой миланских исследователей во главе с G. Simoiii. В последующие годы были предложены различные модификации метода, которые затрагшзают все этапы обработки ворсин. По существу все варианты метода можно разделить на две группы:
— собственно «прямой», основанный на кратковременной (2—3 ч) преинкубации нативных ворсин перед гипотонической обработкой и фиксацией;
— «полупрямой», предполагающий увеличение времени инкубации нативных ворсин в культуральной среде с питательными добавками до 24,48 или 72 ч.
Читайте также: Возникновение проводящей механической ткани
Несмотря на кажущуюся простоту, эти способы редко дают стабильные результаты и поэтому, как правило, используются в сочетании с культивированием. Типичными недостатками описанных вариантов прямого метода являются малое число метафазных пластинок, артефактная утрата хромосом при мацерации образца в уксусной кислоте и малая пригодность хромосом для стандартной дифференциальной окраски красителем Гимза. Подсчет числа митозов на «прямых» и «полупрямых» препаратах показал, что при инкубации ворсин в течение 2- 3 сут митотическая активность клеток цитотрофобласта выше, чем при 2- или 24-часовой инкубации. Это позволило предположить, что в момент биопсии клетки испытывают «шок», при котором нарушаются параметры клеточного цикла, и не вступаютв митоз.
Нами разработаны собственные модификации прямого метода — метод «стряхивания-отпечатывания» и ускоренный прямой метод. Использование больших доз колхицина с одновременной обработкой в гипотоническом растворе позволяет получать препараты из хориона/плаценты в сроки беременности от 10 до 20нед, удовлетворяющие всем критериям кариотипирования. В сочетании с флюоресцентными методами дифференциальной окраски хромосом результативность этих методов превышает 99%.
Следует подчеркнуть, что эти модификации пригодны для приготовления препаратов хромосом из тканей с высокой естественной митотической активностью, включая любые ткани и органы зародыша. Интерфазные ядра, обработанные таким способом, вполне пригодны для FISH-метода со специфическими ДНК-зондами , что важно при верификации цитогенетического пренатального диагноза. Детально методики приготовления препаратов и варианты дифференциальной окраски описаны нами ранее.
Высокая эффективность, быстрота и надежность при минимальной себестоимости обеспечили быстрое внедрение этих модификаций в различных пренатальных диагностических центрах России и стран ближнего зарубежья.
Цитогенетическое исследование материала абортуса (исследование хориона)
Стоимость анализа
стоимость указана без учета стоимости забора биологического материала
Готовность результатов анализа
Обычные*: 21 р.д.
Дата сдачи анализа:
Дата готовности:
Где и когда можно сдать
Подготовка к анализу
Анализ требует специальной подготовки и условий сдачи, воспользуйтесь, пожалуйста, памяткой.
Методы выполнения и тесты
Микроскопия. Определение кариотипа (хромосомного набора) плода в материале, полученном в результате выскабливания/выкидыша
Файлы
Значение анализов
Условия сдачи анализа
Скачайте и заполните документы для оформления анализа:
Заполненное согласие и анкету передайте вместе с материалом.
В случае бихориальной двойни биоматериал принимается в двух разных контейнерах с физ. раствором, копия УЗИ обязательна. Оплата за исследование каждого плода принимается отдельно, результат исследования выдаётся по каждому кариотипу отдельно.
В случае монохориальной двойни биоматериал принимается в одном контейнере с физ. раствором, результат кариотипа выдаётся единый для двух плодов.
Вы можете оплатить анализ и курьерскую доставку на сайте. При оплате через интернет-магазин действует скидка. Внимательно ознакомьтесь с условиями и правилами курьерской доставки!
Также спрашивают:
С этим анализом сдают:
Как сдать анализы в Лабораториях ЦИР?
Для экономии времени оформите заказ на анализ в Интернет-магазине! Оплачивая заказ онлайн, Вы получаете скидку 10% на весь оформленный заказ!
У Вас есть вопросы? Напишите нам или позвоните +7 (495) 514-00-11. По анализам Вы можете задать вопрос на нашем форуме и обратиться на консультацию к специалисту.
Читайте также: Шкаф вместо дверей тканью
XI Международная студенческая научная конференция Студенческий научный форум — 2019
Анализ аномалий кариотипа хориона при неразвивающейся беременности
Актуальность: Низкая рождаемость в России в последние годы усугубляется репродуктивными потерями, значительная часть которых приходится на неразвивающуюся беременность (НБ). Проблема замершей беременности имеет не только медицинское, но и социальное значение: 12-20% всех клинически установленных беременностей заканчиваются самопроизвольным выкидышем. Нарушение репродуктивной функции женщины, выразившееся в спонтанном прерывании беременности, может быть обусловлено действием различных факторов. Это гормональные нарушения, воспалительные заболевания, нарушения обмена веществ и процессов свертывания крови, анатомические дефекты половых органов, сбалансированные хромосомные перестройки родителей, влияние эмбриотоксических и тератогенных веществ
Цель исследования: сравнить и изучить частоты и спектры аномалий кариотипа хориона при неразвивающейся беременности, наступившей естественным путем.
Для анализа брали абортный материал женщин с диагнозом неразвивающаяся беременность(НБ). Основаниями для постановки диагноза были: несоответствие размеров матки и плодного яйца сроку беременности; отсутствие сердцебиения и двигательной активности эмбриона; отсутствие сформированного эмбриона в полости плодного яйца.
Так же оценивался уровень хорионического гонадотропина в крови у матери, который был ниже нормальных показателей. В случае диагностики замершей беременности всем пациенткам проводилась вакуум-аспирация плодного яйца. Из полученного операционного материала получали препараты метафазных хромосом. Для хромосомного анализа использовался «прямой» метод по общепринятой методике. Данный метод основан на анализе контактных митозов клеток цитотрофобласта, при этом анализируют по 11-20 метафазных пластинок.
Результаты
В ходе кариотипирования аномальный кариотип был выявлен в 70% случаев замершей беременности.
Среди геномных мутаций преобладающим типом нарушения кариотипа является трисомия. В более 50% случаев трисомии-это были изолированные трисомии по разным хромосомам. Помимо данных типов трисомии, так же встречалась двойная трисомия и триплодия.
В числе анеуплодий следует отметить, что встретилась моносомия по Х-хромосоме.
Так же были выявлены хромосомные мутации. Они характеризуются структурными изменениями отдельных хромосом. Данные нарушения сочетались с анеуплодией, были представлены маркерными хромосомами, делециями, дериватными хромосомами.
Были отмечены спонтанные хромосомные аберрации(ХА)
Выявлены мозаичные формы анеуплоидных нарушений, которые ,так же как и регулярные, могут приводить к внутриутробной гибели плода. Но данные мозаичные формы могут иметь механизм «коррекция трисомной зиготы». В данном случае, если зигота является трисомной, то возникновение хромосомного мозаицизма может быть обусловлено митотическим нерасхождением или анафазным отставанием дополнительной хромосомы в ряде клеток на постзиготической стадии развития.
Второй по численности их аномалий была триплодия. Ее возникновение обусловлено как результат диандрии или диспермии, в остальных случаях как результат дигинии
Одной из причин замершей беременности является возраст матери. Это связано с тем, что с возрастом женщины происходит накопление мутаций, которые в дальнейшем могут сказаться на состоянии плода. отмечена положительная корреляционная зависимость спонтанных аберраций плода от возраста матери, что является доказательством накопления мутаций в гаметах и может быть причиной бесплодия .
Изменение кариотипа плода чаще возникали у пациенток, уже имевших НБ в анамнезе. Это позволяет предположить, что некоторые пациентки имеют генетическую предрасположенность к НБ.
Так же среди причин НБ можно выделить полиморфизмы генов обмена фолатов у родителей, генные болезни, носительство родителями сбалансированных хромосомных перестроек.
Читайте также: Как обшить корзинку тканью мастер класс
Большинство спонтанных прерываний беременности приходится на 6-8 неделях гестации. Следовательно, период, соответствующий началу формирования плаценты и активному органогенезу, является критическим для эмбрионального развития человека, и ведущую роль в прерывании беременности могут играть такие негенетические факторы, как недостаточность синтеза хорионического гонадотропина, дефицит прогестерона, гиперандрогения, инфекционный фактор, антифосфолипидный синдром, повреждающее действие экзогенных агентов.
Одним из важнейших показателей, который отражает различия в жизнеспособности организмов разного пола в различные периоды онтогенеза, является соотношение полов. Считается, что мужские эмбрионы значительно более подвержены смертности, поскольку эмбрионы девочек считались более здоровыми. на ранних сроках беременности значительно чаще гибнут эмбрионы мужского пола, а вот уже во время 10-15 недели беременности больше умирает эмбрионов женского пола. этот процесс связан с особенностями инактивации X-хромосом. Так, женский организм имеет сразу две Х-хромосомы, одна из которых отключается в каждой клетке. Но в случае если доминантная Х-хромосома начинает захватывать все клетки, происходит генетический сбой, провоцирующий прерывание беременности.
Таким образом, аномалиям кариотипа принадлежит доминирующее значение в этиологии НБ ранних сроков. Следует также отметить, что отсутствие видимых хромосомных мутаций при стандартном кариотипировании не исключает всего спектра генетических нарушений.
Внедрение в клиническую практику цитогенетического анализа хориона при НБ позволит в большинстве случаев выявить истинную причину и дать клинические рекомендации. Часто наличие анеуплоидии или полиплоидии при спорадической НБ является случайным процессом. Однако анеуплоидия в абортном материале при привычном невынашивании или наличие структурных изменений хромосом требуют дальнейшего обследования супружеской пары.
1. Александрова, Н. В. Структура хромосомной патологии при неразвивающейся беременности, наступившей в ходе использования вспомогательных репродуктивных технологий / Н. В. Александрова, О. А. Доронина, О. Р. Баев // Проблемы репродукции. — 2012. — № 2. — С. 51-56.
2. Баранов, В. С. Генетический паспорт — основа индивидуальной и предиктивной медицины / В. С. Баранов. — Спб. : Изд-во Н-Л, 2009. — 528 с.
3. Баранов, В. С. Цитогенетика эмбрионального развития человека / В. С. Баранов, Т. В. Кузнецова. -Спб. : Изд-во Н-Л, 2007. — 640 с.
4. Воробцова, И. Е. Возрастная зависимость частоты стабильных хромосомных аберраций, определяемых методом FISH, в лимфоцитах здоровых доноров и лиц, подвергшихся неконтролируемому облучению в малых дозах / И. Е. Воробцова, Н. М. Тимофеева, А. Н. Богомазова // Российский биомедицинский журнал Medline.Ru. — 2003. — Т. 4. -С. 125-127.
5. Лебедев, И. Н. Тканеспецифичный плацентарный мозаицизм по аутосомным трисомиям у спонтанных абортусов человека: механизмы формирования и фенотипические эффекты / И. Н. Лебедев, С. А. Назаренко // Генетика. — 2001. — Т. 37, № 11. -С. 1459-1474.
6. Полиморфизм генов фолатного обмена и болезни человека / И. Н. Фетисова, А. С. Добролюбов, М. А. Липин, А. В. Поляков // Вестник новых медицинских технологий. — 2007. — Т. 10, № 1.
7. Сравнительный анализ аномалий кариотипа при неразвивающейся беременности, наступившей естественным путем и с применением вспомогательных репродуктивных технологий / О. Г. Чиря-ева, Л. И. Петрова, А. А. Пендина, А. В. Тихонова, О. А. Ефимова, В. С. Дудкина, Н. А. Садик // Журнал акушерства и женских болезней. — 2012. -Т. LXI, вып. 3. — С. 132-138.
- Свежие записи
- Балкон в многоквартирном доме: является ли он общедомовым имуществом?
- Штраф за остекление балкона в 2022: что это и как избежать наказания
- Штраф за мусор с балкона: сколько заплатить за выбрасывание окурков
- Оформление балконного окна: выбираем шторы из органзы
- Как выбрать идеальные шторы для маленькой кухни с балконом