Станция для заливки ткани в парафин что это такое

Станция для заливки в парафин HistoStar – это современный эргономичный прибор с русским интерфейсом, удобным сенсорным экраном и широким выбором дополнительных опций.
HistoStar обеспечивает быстрое изготовление высококачественных парафиновых блоков, что в свою очередь облегчает изготовление качественного информативного среза, свободного от артефактов.

Станция для заливки состоит из двух модулей:

Модуль для заливки:

Парафиновый бак на 5л;
Диспенсер парафина с регулировкой скорости подачи;
Подогреваемые рабочие поверхности;
Подогреваемые ячейки для пинцетов;
Охлаждаемая площадка;
Подогреваемый лоток для кассет, вмещающий не менее 6ти корзин автомата для проводки Exelsior;
Подогреваемая полка для заливочных форм;
Светодиодная подсветка с регулировкой яркости;
Устройство для удаления с кассеты излишков парафина
Окружающая рабочую зону не нагреваемая поверхность служит удобной опорой для рук Модуль охлаждения парафиновых блоков:
Охлаждение до -12°C;
Большая охлаждающая плата позволяет размещать большое количество образцов

Станция для заливки в парафин HistoStar оснащена функцией “программируемые рабочие часы”, включая автоматический старт. Температура всех поверхностей независимо регулируется, программируется по времени; информация о параметрах прибора отражается на сенсорном жидкокристаллическом дисплее.

Дополнительные принадлежности:

Пинцеты с электрическим подогревом для ориентации кусочков при заливке блоков, с возможностью работы как правой, так и левой рукой; Широкопольный увеличитель;
Педаль дозирования парафина;
Заливочные формы для формирования блока разных размеров.

РАСХОДНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

ПАРАФИНЫ

Применение

ЗАЛИВОЧНЫЕ ФОРМЫ

Металлические заливочные формы охватывают всю площадь заливаемого препарата, что гарантирует использование оптимального количества парафина при каждой заливке. Поверхности форм закруглены и отполированы для более легкого отделения блока и удобства очистки. Крылышки у форм облегчают манипуляции и улучшают их устойчивость на рабочей поверхности. Заливочные формы произведены из нержавеющей стали.

Мы предлагаем следующие размеры металлических формы:

7х7 мм, 15х15 мм, 25х25 мм, 25х30 мм, 25х37 мм

Упаковка содержит 12 металлических форм

Помимо металлических форм, мы предлагаем одноразовые пластиковые формы, для лаборантов, которые ценят свое время и не тратят его на мытье металлических форм.

По своему внешнему виду они похожи на ячейки для льда, но глубже.

После заливки и застывания парафина, достаточно раскрыть стенки и вы получаете ровный блок, готовый для резки.

Мы предлагаем следующие размеры пластиковых форм:

12х12х20 мм, 22х22х20 мм, 30х22х20 мм, 40х22х20 мм

Заливка гистологического материала

Здравствуйте, коллеги!

После того или иного способа гистологической проводки образцы ткани
должны быть залиты в парафин или другие заливочные среды.

В этом выпуске «Образователя» мы остановимся на ключевых
моментах процесса заливки в парафин, дадим практические советы по изготовлению парафиновых блоков и поговорим о том, как подготовить их к микротомии.

После проводки желательно максимально быстро залить образцы ткани
в парафин, поскольку избыточное пребывание в нем объектов
может их уплотнить. Ткани можно задерживать в заливочном
центре или последней станции парафина на срок около 1-2
часов, но не более. Мелкие биопсии особенно не
рекомендуется передерживать в парафине, так как это пересушивает их.
В некоторых случаях, например, при проводке в двух корзинах
карусельного процессора, материал из второй корзины должен
быть выдержан в последнем парафине дополнительное время,
ведь финиш процесса проводки считается по первой корзине. В этом случае первая корзина находится в последнем парафине, а вторая — в предпоследнем, следовательно, в ней образцы будут недопроведенными по времени этой станции. Здесь можно отправить на заливку первую корзину, а на её место поместить вторую.

Читайте также: Красивая ткань для подушек

Заливка материала

Заливку можно выполнять двумя способами: вручную, используя
разные формы и автоматически, с помощью заливочного
центра. В заливочном центре есть таймеры старта и отсрочки. Желательно заливочный центр держать горячим в течение всего рабочего дня, например, с 6 утра и до 17 часов, так как перезаливка может потребоваться в любое время.

При любом способе необходимо соблюдать следующие
принципы:

Заливочный парафин должен быть нагрет на 5-6оС выше
точки плавления парафина и при заливке он не должен
застывать. При застывании и наливке остывшего парафина в
нем образуются пузырьки воздуха.
Ткань, подлежащая заливке, также не должна застывать и покрываться плёнкой.
Заливать нужно с помощью горячего, но и не перегретого
пинцета, чтобы не оставить ожоги на ткани.
Пинцет необходимо протирать после каждого залитого объекта во избежании попадания микроскопических кусочков в другой блок. Бывает, невидимые глазу кусочки соскобов или плацент попадают в материал другого пациента, и патологам остаётся только гадать, откуда, например, в коже ворсины хориона.

5. Следует сперва наливать парафин в форму, а затем помещать в него кусочек ткани и ориентировать в форме так, как необходимо (об ориентации объектов расскажем в наших следующих выпусках).

6. При заливке формы не должны быть переполнены, но количество налитого парафина должно быть достаточным, чтобы блок удерживался на кассете во время микротомии.

7. Необходимо избегать механического травмирования
заливаемых объектов, они могут распадаться от сильного
нажатия.

8. При заливке вручную на верхнюю часть залитого блока
помещают номер. При заливке в аппарате, сверху заливочной
формы помещают маркированную кассету.

9. Дать остыть блоку. Чем блок больше и толще, тем дольше
он должен застывать.

10. По окончании работы с каждого рабочего место должны
быть убраны все остаки парафина и заливаемого материала, а ёмкости для расплавленного парафина должны быть наполнены.

Как понять, что блок застыл?

Парафин начинает застывать со всех краев одновременно, и происходит это
относительно быстро, за несколько минут. Но внутри он
застывает дольше, и длится этот процесс может от 20 минут до суток (в зависимости от состава парафина и размера блока).

Если после схватывания блока форму с залитым кусочком ткани из заливочного центра поместить в морозилку, то блок уже можно будет резать примерно через 1 час.

Из формы блок можно вынуть через несколько минут, парафин
на холоде сжимается и отскакивает от формы (обычно
раздается характерный щелчок; если блоков много — можно
услышать треск). Но это не значит, что блок готов к резке, его
нужно еще подержать в морозилке или на охлаждающей панели, желательно не менее часа.

Практические советы

При работе с большим количеством кассет обязательно нужно
соблюдать правило: открывать только одну кассету, заливать
только одну форму и следующую кассету брать в руки только
после сбрасывания крышки (при использовании заливочной станции) или всей кассеты (при ручном
методе, если лабораторию не обеспечивают кассетами и приходится их вторично использовать).

Чтобы уголки или формы не прилипали к поверхностям и друг другу, и от них легко отходил парафин, их нужно смазывать раствором этанола/глицерина 1/1, либо 4/1.

Пинцет также не должен остывать при заливке. Лучше всего пользоваться специальными пинцетами с электроподогревом. При их отуствии нагревать пинцет можно над пламенем спиртовки (не самый безопасный метод), нагревательных столиках, либо подогревать инструменты в специальных лунках заливочного центра.

Парафин для заливки лучше использовать тугоплавкий, 58-60оС, поскольку, чем парафин труднее плавится, тем он меньше нагревается в процессе микротомии, и с такого блока проще получить тонкий срез.

Продуктивность этапа

Средний уровень продуктивности на заливке равен 60 блоков/час. Он посчитан исходя из коэффициента использования рабочего времени 75% и эквивалентен различным уровням выхода: 90 блоков/2 часа и 180 блоков/4 часа.
Поскольку при заливке высокий уровень напряжения, то эта задача должна быть ограничена сменой, но не более 4 последовательных часов.
Поэтому рабочее место для заливки должно быть хорошо освещено, не быть на сквозняке или в холоде и оснащено удобными инструментами (пинцетами, прессами для придавливания материала к дну блока) и мебелью, позволяющей работать несколько часов непрерывно.

Читайте также: Пробка растений это проводящая ткань

Станция для заливки парафином ESD-2800

Большая емкость для парафина;
Подогреваемые гнезда для пинцетов;
Большая эргономичная рабочая поверхность позволяет обрабатывать множество блоков одновременно;
Специальная система обеспечивает точную настройку подачи парафина;
Охлаждающая площадка на основе элемента Пельтье (температура от комнатной до -5ºС) позволяет работать с образцами разных размеров, в том числе мега-кассетами;
Система удаления избытка парафина в два больших съемных лотка;
Максимальная температура нагрева 90 ºС, регулировка температуры осуществляется с помощью контрольной панели

Криомодуль ESD-2800 имеет охлаждающую рабочую поверхность для быстрого охлаждения парафиновых блоков после заливки. Температурный интервал — от комнатной температуры до -15 ºС. Криомодуль может использоваться как автономный прибор.

На термомодули ESD-2800 располагают образцы тканей в любых типах кассет, ожидающие заливки в парафин. Образцы хранятся и подогреваются в большой емкости объемом 252 кассеты. Температура может быть доведена до 99 ºС. Термомодуль может использоваться как водяная баня или ванна для расправления срезов.

Заливка гистологического материала

библиографическое описание:
Заливка гистологического материала — .

ЗАЛИВОЧНЫЕ СРЕДЫ

Для получения тонких (до 6 мкм) гистологических срезов необходимо фиксированный и промытый материал залить в плотную среду, предварительно пропитав ею кусочки тканей. В зависимости от способа растворения все заливочные среды разделяют на растворимые в органических растворителях и водорастворимые. К первым относятся парафин, пластические полимеры на основе парафина, целлоидин, ко вторым — желатин, полиэтиленгликоли, полиэфиры, некоторые метакрилаты и т.д.

Парафин — смесь высокомолекулярных предельных углеводородов, продукт перегонки нефти; растворяется в анилине, бензоле, бергамотном масле, целлозольве, хлороформе, декалине, диоксане, бутаноле, пропаноле, толуоле, трихлорэтилене, ксилоле. Каждый из этих растворителей можно использовать в качестве промежуточной среды между спиртом и парафином. Температура плавления различных парафинов от 27 до 62 °С. В гистологической технике применяют парафин с температурой плавления 56 °С. Зарубежные фирмы производят специальный парафин для гистологических исследований, содержащий различные пластические полимеры, такие как диметилсульфоксид. Их коммерческие названия «Парапласт», «Парапласт плюс», «Гистопласт С», «Гистозес».

Важнейшим условием успешной заливки материала является своевременная смена реактивов в процессе их загрязнения, а также соблюдение рекомендуемых временных и температурных параметров. Кроме того, нужно стремиться к тому, чтобы одновременно заливать одинаковые по толщине и плотности кусочки ткани.

хлороформ+парафин (1:1 — «каша») 37 «С 2-3ч

или ксилол+парафин (1:1 — «каша») 37 °С 1-2ч

спирт 100 % + хлороформ (1:1) 2-3ч

хлороформ+парафин (1:1) 37°С 3-6ч

хлороформ+парафин (1:1) 56°С 0,5-1ч

Заливка по Ромейсу ручным способом

Заливка в парапласт с помощью автомата

Заливка в парапласт с помощью вакуум-автомата.

Быстрая заливка в парапласт с помощью автомата

Фиксация в 5 % формалине 2ч

Фиксация в 5 % формалине при 60 °С 10мин

Промывание в проточной воде 2ч

50% изопропиловый спирт 2ч

100% Изопропиловый спирт I 4ч

Парапласт плюс I 60 °С 15мин

Парапласт плюс 60 °С 30мин

Наиболее быстрым, простым, не требующим применения специальной аппаратуры методом заливки материала является способ, разработанный И. И. Золотых в патологоанатомическом отделении Института хирургии им. А. В. Вишневского.

Хлороформ-парафин при 56 °С 15 мин

Парафин при 56 °С, энергично встряхивая 1 мин

Продолжительность 2 ч 30 мин

У нас заливка проходит следующим образом:

Промывка проточной водой 1 час

спирт 70% (обезвоживание) больше 4 часов

спирт+хлороформ 1:1 до 1 часа(пересушивается)

хлороформ чистый до 1 часа

хлороформ+парафин 1:1 37С до 1 часа

Для приготовления препаратов следует:

ксилол 1 (депарафинизация) 56С 10 м

промываем дистиллированной водой

ксилол 56С больше 10 м (для просветления)

Особенности заливки в парафин крупных объектов

Заливка в парафин позволяет получать гистологические срезы больших размеров (гистотопографические срезы), например срезы всего органа (матка, почка) или его значительной части (доля легкого). Заливку проводят вручную, и для нее требуется дополнительное время на всех этапах. Для приготовления таких срезов из ткани головного мозга с помощью мозгового ножа делают срез свежей ткани толщиной около 1 см и закладывают в ванну с фиксатором. Для того чтобы сохранить плоскую конфигурацию среза, его кладут между двумя проволочными сетками, которые притягивают друг к другу резиновыми кольцами. Продолжительность фиксации 48 ч. После промывки в проточной воде (3—4 ч) следует обезвоживание в 70 %, 96 % и 100 % спирте (по 2 смены) в течение 48 ч. Для обезвоживания можно применить изопропиловый спирт, обеспечивая частую его смену и температуру 45 °С (в термостате). Это позволяет избежать получения чрезмерно жестких препаратов. В качестве промежуточной среды используют метилбензоат или хлороформ — 3 смены по 3 дня. Объекты заливают в парафин или парапласт, имеющие температуру плавления 56—58 °С.

Читайте также: Состав эпителиальной ткани у растений

Приготовление парафиновых блоков

Пропитанные парафином кусочки ткани выкладывают в специальные формочки и заливают расплавленным в термостате или на водяной бане при 60 °С парафином, в который добавлено 1 — 3 % воска.

Для получения парафиновых блоков нужной формы используют различные приспособления. К ним относятся изготовляемые самим лаборантом бумажные коробочки, на дно которых выкладывают кусочки, а рядом к боковой стенке ставят этикетку номером кнаружи; металлические Г-образные угольники или разъемные формочки, которые перед употреблением смазывают глицерином и помещают на нагретую металлическую пластинку, выполняющую роль дна формочек. Применяют также различные пластмассовые коробочки и формы, в частности используемые в микробиологии, особенно при заливке мелких объектов, таких как материал пункционных биопсий.

Специальные импортные аппараты для заливки в парафин (так называемые заливочные центры) снабжены набором различных формочек (кассет) и пинцетов. В них обеспечивается автоматическая подача дробных доз парафина оптимальной температуры.

Раскладывание кусочков в формочки и их ориентирование нужно проводить быстро теплым пинцетом. Если материала для заливки много и он быстро остывает, то можно использовать парафин, подогретый на водяной бане до 60 °С. Для охлаждения формочки с материалом рекомендуют помещать в воду при 10— 18 °С, но не погружать в нее. При застывании парафина поверхность блока стягивается, и в нем образуется кратерообразное углубление. Это нужно учитывать при заливке кусочков и в дальнейшей работе с блоками. Парафин должен на 3—4 мм выступать над поверхностью блока, если предстоит монтировать его на деревянную колодку. Возможны также заливка блока большим количеством парафина и резка без использования деревянных колодок, с успехом применяемая даже на санном микротоме.

В большинстве руководств рекомендуют после подравнивания и удаления лишнего парафина наклеивать блоки на деревянные бруски с помощью подогретого на спиртовке металлического шпателя или скальпеля. Затем для обеспечения более прочного приклеивания основания блок оплавляют с четырех боковых сторон тем же горячим шпателем или скальпелем.

Заливка ткани в целлоидин

Целлоидин — хорошо растворяющаяся в эфире нитроклетчатка. В гистологической практике применяют 2 %, 4 % и 8 % растворы целлоидина, которые готовят из целлоидиновых пластин или отмытой от эмульсии и высушенной рентгеновской пленки.

Для приготовления 500 мл 2 % раствора целлоидина 10 г сухого целлоидина заливают 250 мл 100 % спирта и оставляют на 1 сут, затем добавляют 250 мл безводного эфира, который растворяет набухший в спирте целлоидин. Для приготовления 4 % и 8 % растворов количество целлоидина увеличивают соответственно в 2 и 4 раза. Растворы хранят в плотно закрытой посуде.

Заливка ткани в целлоидин стала в настоящее время менее популярной, чем парафиновая, и ее применяют главным образом для обработки труднорежущихся тканей и объектов больших размеров, с которых трудно получить хорошие парафиновые срезы. Целлоидиновую заливку используют также в тех случаях, когда необходимо избежать воздействия на исследуемый материал высоких температур. Кроме того, заливка материалов в целлоидин позволяет получить лучшие результаты при наличии в объектах больших полостей, лакун и слоев различной консистенции.

Эфир и сухой целлоидин огнеопасны, поэтому при работе с ними необходима осторожность.

Обезвоженный материал помещают в смесь 100 % спирта с эфиром (1:1) на 4—6ч, переносят в 2 % раствор целлоидина на 2—3 дня, затем в 4 % и 8 % растворы на 5—7 дней в каждый. Пропитанный кусочек заливают свежим 8 % целлоидином и уплотняют в парах хлороформа (в эксикаторе). Уплотненный таким образом материал заливают 70 % спиртом для хранения. Вырезанные блоки наклеивают густым целлоидином на деревянные колодки на 1 суток перед резкой.

Свежие записи
- Балкон в многоквартирном доме: является ли он общедомовым имуществом?
- Штраф за остекление балкона в 2022: что это и как избежать наказания
- Штраф за мусор с балкона: сколько заплатить за выбрасывание окурков
- Оформление балконного окна: выбираем шторы из органзы
- Как выбрать идеальные шторы для маленькой кухни с балконом