Оборудование и материалы: лабораторный микроскоп, гистологические препараты:
Гиалиновый хрящ ребра кролика
Эластический хрящ ушной раковины свиньи (вертикальный срез)
Волокнистый хрящ межпозвоночного диска
Костные клетки жаберной крышки селедки
Берцовая кость человека в поперечном разрезе
Берцовая кость человека в продольном разрезе
Лабораторная работа рассчитана на 3 аудиторных часа.
Ход работы:
1. Рассмотреть препарат 1. Гиалиновый хрящ ребра кролика (рис. 4.2). Окраска гематоксилин-эозином.
Под малым увеличением микроскопа видно, что хрящ окрашен в голубой цвет и окружен бледно-розовой тканью, которая является надхрящницей. Глубже располагаются хондробласты. Хондробласты – клетки небольшого размера, имеют удлиненную форму, вытянуты вдоль хряща. Хондробласты, секретируя матрикс хряща, постепенно окружаются межклеточным веществом и превращаются в хондроциты.
В участках хряща, граничащих с надхрящницей, хондроциты имеют вытянутую форму, как и хондробласты, только крупнее размером. В глубоких слоях клетки округлой формы, образуют изогенные группы из 2-4 хондроцитов.
Капсулы вокруг изогенных групп окрашены в темно-фиолетовый цвет и представляют собой уплотненное межклеточное вещество.
Межклеточное вещество хряща состоит из светлоокрашенной однородной массы.
Гиалиновая хрящевая ткань является наиболее распространенной разновидностью хрящевой ткани (хрящи ребер, трахеи, гортани, воздухоносных путей, суставных поверхностей и проч.).
2. Зарисовать и обозначить: 1) надхрящницу; 2) хондробласты; 3) молодые хондроциты; 4) изогенные группы хондроцитов и в них: а) капсулы, б) хондроциты; 5) межклеточное вещество.
3.Рассмотреть препарат 2. Эластический хрящ ушной раковины свиньи (вертикальный срез) (рис. 4.3). Окраска орсеином.
Эластический хрящ по общему строению сходен с гиалиновым. Снаружи он также покрыт надхрящницей. Хрящевые клетки располагаются поодиночке или образуют изогенные группы. Вокруг изогенных групп нет отчетливых базофильных зон, как в гиалиновом хряще.
Одной из главных отличительных черт эластического хряща является наличие в его межклеточном веществе наряду с коллагеновыми эластических волокон, окрашенных орсеином в буро-коричневый цвет, которые проходят в межклеточном веществе во всех направлениях. Волокна в поверхностных слоях хряща тонки, в глубоких слоях более толстые.
Эластическая хрящевая ткань встречается в тех органах, которые подвергаются изгибам (ушная раковина, надгортанник, рожковидные и клиновидные хрящи гортани и др.).
4. Зарисовать и обозначить: 1) надхрящницу; 2) хондробласты; 3) молодые хондроциты; 4) изогенные группы хондроцитов; 5) межклеточное вещество; 6) эластические волокна.
5. Рассмотреть препарат 3. Волокнистый хрящ межпозвоночного диска. Окраска гематоксилин-эозином.
Волокнистый хрящ встречается в межпозвоночных дисках и в местах перехода связок (коллагеновой соединительной ткани) к типичному гиалиновому хрящу. Это уникальный вид хрящевой ткани, обладающий характерными свойствами гиалинового хряща и волокнистой соединительной ткани. Хрящевые клетки располагаются поодиночке или образуют редкие изогенные группы по две клетки; их внутреннее строение аналогично таковому хондроцитов других видов хрящей. Межклеточное вещество содержит параллельно направленные коллагеновые пучки, постепенно разрыхляющиеся и переходящие в гиалиновый хрящ или в плотную соединительную ткань связок суставов.
6. Рассмотреть препарат 4. Костные клетки жаберной крышки селедки (рис. 4.4).
На препарате хорошо видны остеоциты с многочисленными отростками, одни из которых разрезаны продольно, другие – поперечно. Это преобладающие клетки костной ткани, утратившие способность к делению. Остеоциты располагаются в собственных лакунах, повторяющих форму клеток и отростков. В клетке – крупное ядро, базофильная цитоплазма, органеллы развиты слабо.
7. Зарисовать и обозначить: 1) остеоциты в лакунах, 2) отростки остеоцитов; 3) межклеточное вещество.
8. Рассмотреть препарат 5. Берцовая кость человека в поперечном разрезе (рис. 4.5).
Под малым увеличением микроскопа видна надкостница желтого, коричневого или зеленого цвета. Под надкостницей располагается тонкий слой общих внешних пластинок, расположенных по периметру кости параллельно друг другу. Глубже находятся остеоны, представляющие системы концентрических пластинок, вставленных одна в другую.
Выбрать остеон с четкими очертаниями пластинок и рассмотреть под большим увеличением. В центре располагается канал остеона (гаверсов), где можно видеть срез кровеносного сосуда с остатками крови. Между остеонами лежат вставочные пластинки. Вокруг костномозговой полости рассмотреть тонкий внутренний слой общих пластинок.
Под большим увеличением в любых пластинках видны остеоциты, лежащие в лакунах параллельно направлению пластинки, и их отростки, проходящие в костных канальцах перпендикулярно направлению пластинки.
9. Рассмотреть препарат 6. Берцовая кость человека в продольном разрезе.
Видны те же структуры, что и на поперечном срезе. Дополнительно можно увидеть прободающие каналы и анастомозы между каналами остеонов с кровеносными сосудами.
Читайте также: Ткани плотные красного цвета
Практическая часть
Препарат №20. Гиалиновый хрящ. Ребро кролика. Гематоксилин-эозин.
При малом увеличении видна надхрящница и лежащая под ней хрящевая ткань. Причем ближе к надхрящнице лежит слой молодого хряща, а затем зрелая хрящевая ткань.
При большом увеличении можно увидеть, что в состав промежуточного вещества надхрящницы входят коллагеновые волокна, фибробласты. Хондроциты – клетки хрящевой ткани, располагающиеся по разному. В надхрящнице и в молодом слое хряща большое количество молодых хрящевых клеток – хондробластов, а в промежуточном веществе хряща, в результате пролиферации, хонроциты располагаются в хрящевых полостях (лакунах) группами. Эти группы называются изогенными. Межклеточное вещество, образующее стенку лакун окрашивается оксифильно, территориальный матрикс (содержащийся в полостях) – базофильно, интерриториальный матрикс окрашивается слабо базофильно или слабо оксифильно.
. Гиалиновый (стекловидный) хрящ ребра: 1 — надхрящница; 2 — зона хряща с молодыми хрящевыми клетками; 3 — основное вещество; 4 – высокодиф-ференцированные хрящевые клетки; 5 — капсула хрящевых клеток; 6 — изогенные группы хрящевых клеток; 7 — базофильные слои основного вещества вокруг хрящевых клеток
Препарат №21. Эластический хрящ. Ушная раковина свиньи. Орсеин.
В состав эластического хряща, кроме коллагеновых волокон, входит большое количество эластических волокон, которые образуют густую сеть. На периферии хрящевой пластинки волокна более тонкие и ветвящиеся, к центру они утолщаются. Основной матрикс окрашен в светло-коричневый цвет. Как и в гиалиновом хряще, в эластическом содержатся изогенные группы, однако в них содержится меньшее число хондроцитов, обычно 2-3 и они крупнее.
Эластический (сетчатый) хрящ ушной раковины: 1 — надхрящница; 2 — основное вещество; 3 — сеть эластических волокон; 4-хрящевые клетки; 5- лакуна хрящевых клеток; 6 — ядра хрящевых клеток; 7 — изогенная группа хрящевых клеток.
Препарат №22. Волокнистый хрящ. Межпозвоночный диск теленка. Гематоксилин-эозин.
При большом увеличении можно рассмотреть, что основное вещество — коллагеновые волокна, ориентированные в одном направлении. Между пучками коллагеновых волокон располагаются тонкие прослойки гиалинового хряща, с расположенными в нем одиночными или небольшими изогенными группами хондроцитов. Волокнистый хрящ представляет собой промежуточное положение между сухожилием и гиалиновым хрящом. Поэтому, передвигая препарат от гиалинового гряща развивающегося позвонка к сухожилию, можно увидеть переходы между этими тканями. В гиалиновом хряще коллагеновые волокна располагаются отдельными группами, затем их становится больше и, постепенно утолщаясь, они вытесняют гомогенное вещество.
Коллагеново-волокнистая хрящевая ткань:1 — пучки хондриновых (коллагеновых) волокон; 2 — хрящевые клетки между пучками хондриновых волокон
Препарат №23.Развитие кости на месте соединительной ткани. Гематоксилин- эозин.
По краям располагаются довольно крупные угловатые одноядерные клетки — остеобласты. Продвигая препарат по разным направлениям можно найти отдельные клетки и небольшие их скопления, уже полностью окруженные промежуточном веществом. Эти клетки уже перешли на стадиюостеоцитов. Электронный микроскоп показал бы, что они обладают многочисленными отростками, уходящими вглубь основного вещества. Внутри участков, где происходит резорбция кости, могут встретиться еще один тип клеток костной ткани —остеокласты, которые осуществляют частичное разрушение костных перекладин. Они содержат большое количество цитоплазмой, содержат многочисленные ядра неправильной формы, много вакуолей и митохондрий.
Читайте также: Катион что это в ткани
Развитие кости на месте соединительной ткани: 1 – мезенхима; 2 – костные трабекулы с костными клетками (остеоцитами); 3 – остеобласты на поверхности костной трабекулы
Препарат №24.Развитие кости на месте хряща. Продольный разрез конечности зародыша свиньи.
Сначала нужно рассмотреть препарат при малом увеличении. На месте будущей кости лежит хрящевая модель, в общем повторяющая ее форму, и в ней можно различить диафиз и два эпифиза. Она состоит из гиалинового хряща, одетого надхрящницей. Окостенение хрящевой модели начинается в центре диафиза, где развивается первичная точка окостенения. В начале окостенения в центре диафиза начинается дегенерация хрящевой ткани, распространяющаяся отсюда по направлению к эпифизам. Если рассматривать препарат при большом увеличении, передвигая его от эпифизов к диафизу, то можно проследить все стадии этого процесса. Концы хрящевой модели, соответствующие эпифизам будущей кости, состоят из типичного гиалинового хряща с базофильным основным веществом, в котором изогенными группами и поодиночке лежат хрящевые клетки. Здесь идет размножение клеток и новообразование основного вещества.
Развитие трубчатой кости на месте гиалинового хряща: 1- эпифизарный гиалиновый хрящ; 2 – надхрящница; 3 – слой столбчатого хряща; 4 – слой пузырчатого хряща; 5 – перихондральная костная манжетка (перихондральная кость); 6 – эндохондральная кость; 7 — надкостница
Препарат №26. Кость в поперечном разрезе. Берцовая кость. Тионин-пикриновая кислота
Снаружи кость покрыта генеральными пластинками. Костные пластинки располагаются в зависимости от распределения в кости кровеносных сосудов. Сосуды располагаются в гаверсовых каналах.
Вокруг гаверсовых каналов в несколько слоев концентрически расположены костные пластинки. Между гаверсовыми системами располагаются вставочные участки, Они имеют неправильную форму.
Под малым увеличением найдите надкостницу, имеющую коричневый цвет, срез кости зеленого цвета; правильно сориентируйте препарат так, чтобы надкостница была в верхней части поля зрения. Под большим увеличением изучите строение различных пластинок кости: генеральных, остеона, вставочных, строение и расположение остеоцитов,
Рис.27. Поперечный разрез декальцинированной трубчатой кости: 1-каналы остеона (гаверсовы) в продольном разрезе; 2-место соединения двух каналов остеона; 3 –вставочный диск, 4 — костные канальцы, 5-остеоциты.
топографию и строение гаверсовых и фолькмановых каналов. Под большим увеличениемотдельно зарисуйте 2-3 остеона, вставочный диск, обозначьте их структуры.
Препарат №27.Костная ткань. Трубчатая кость. Продольный разрез диафиза. Тионин-пикриновая кислота.
Рассмотрите препарат при малом увеличении. На препарате видно, что гаверсовы каналы перерезаны вдоль и имеют вид длинных узких щелей, идущих параллельно друг другу; местами они соединяются с помощью перемычек. Гаверсовы каналы слегка изгибаются и поэтому на срезе обычно представлены короткими отрезками. Хорошо видно, что концентрические костные пластинки идут параллельно гаверсовым каналам, обусловливая продольную исчерченность промежуточного вещества кости. Костные полости лежат в пластинках и между ними и образуют параллельные продольные ряды. При большом увеличении хорошо видны костные полости звездчатой формы и сеть костных канальцев, пронизывающая костное вещество и открывающаяся в гаверсов канал.
Читайте также: Ткань для школьного платья какая лучше
Продольный разрез декальцинированной трубчатой кости: 1-каналы остеона (гаверсовы) в продольном разрезе; 2-место соединения канальцев лакун двух костных пластинок остеона; 3-остеоциты.
Научная электронная библиотека
Глава 1. ХАРАКТЕРИСТИКА ХРЯЩЕВОЙ ТКАНИ ЖИВОТНЫХ
Хрящ – полупрозрачная, бессосудистая соединительная ткань, выполняющая опорно-механическую функцию. Считается, что истинный хрящ имеется только у позвоночных. Но многие беспозвоночные – кольчатые черви, членистоногие, моллюски – также имеют хрящеподобную ткань, построенную из аналогичных исходных макромолекул (Хелминен и др., 1991).
Хрящ у млекопитающих имеется на суставных поверхностях костей, в местах сочленения ребер и грудины, а также сухожилий и костей. Из хрящевой ткани образованы перегородка носа, ушная раковина, гортань и кольца трахеи (Слуцкий, 1969; Павлова и др., 1988).
У хрящевых рыб (акулы, скаты) скелет полностью хрящевой. У хрящевых ганоидов (осетровых) он локально минерализован. У некоторых видов костистых рыб (тихоокеанские лососи) многие части черепа образованы хрящевой тканью. Хрящевые ткани находятся в позвоночной кости между телами позвонков рыб. Большинство костистых рыб содержат незначительное количество хрящевой ткани в межпозвоночных дисках, плавниках, черепной коробке.
У головоногих моллюсков хрящевым скелетом является головная капсула сложной формы, состоящая из трех обособленных отделов, в которых находятся нервные ганглии и статоциты. Кроме того, у некоторых головоногих есть хрящевые образования в основании щупалец и вдоль основания плавников (сепииды и вампироморфы), а также замыкательные хрящи и хрящевые образования на коже некоторых океанических кальмаров. Гладиус кальмаров (скелетная пластинка) в виде узкой перовидной, ланцетовидной или игловидной роговой пластинки располагается на спинной стороне тела по средней линии под слоем кожи или мантийных мышц и не является хрящевым образованием. У плавниковых осьминогов скелетная пластинка – хрящевое образование седловидной или подковообразной формы, поддерживает основания плавников (Несис, 1982).
Хрящевая ткань образована хондробластами и хондроцитами, расположенными поодиночке или группами в окружающем их межклеточном веществе, состоящем из коллагеновых волокон и основного (аморфного) вещества. Хондроциты составляют 1–10 % объема хряща и отвечают за биосинтез и поддержание матрикса. Волокна состоят из молекул коллагена II типа, специфичного для хрящевой ткани, и образуют сеть, плотность которой возрастает вокруг клеток. Основное вещество состоит из высокомолекулярных полимеров – гликозаминогликанов, содержащих значительное количество гексозаминов, которые в тканях присоединены ковалентной связью к белкам (Павлова и др., 1988). Вместе с коллагеном II типа гликозаминогликаны в хрящевой ткани образуют сложный протеогликановый комплекс, молекулярная структура которого обуславливает упругость хряща. Такое сочетание структурных элементов придает уникальные эластические свойства хрящу и позволяет противостоять механическим воздействиям (Слуцкий, 1985, Tryggvason et al., 1987). Схематически структура хряща представлена на рис. 1.
Рис. 1. Строение хрящевой ткани (по Хелминен и др., 1991)
Коллаген отвечает за сопротивление растягивающим усилиям и за поддержание каркаса ткани, а протеогликаны (крупные макромолекулы, заполняющие пространство между коллагеновыми фибриллами) наделяют хрящ амортизирующими свойствами и упругостью. Протеогликаны связывают воду во внеклеточном матриксе, препятствовуют утечке воды при сжатии и впитывают ее обратно. Рост хрящевой ткани происходит в результате деления хрящевых клеток (хондроцитов). С цепью гиалуроновой кислоты соединены агреканы (раньше их называли протеогликановые подъединицы), которые образованы белковой цепью, связанной с боковыми цепями в форме олигосахаридов, кератансульфана и хондроитинсульфата. Связь агрекана с гиалуроновой кислотой стабилизируется двумя молекулами связывающего протеина. (Слуцкий, 1969; Павлова и др., 1988; Марри, Греннер и др., 1993; Риггз, Мелтон, 2000; Adam, 1991, 1995).
- Свежие записи
- Балкон в многоквартирном доме: является ли он общедомовым имуществом?
- Штраф за остекление балкона в 2022: что это и как избежать наказания
- Штраф за мусор с балкона: сколько заплатить за выбрасывание окурков
- Оформление балконного окна: выбираем шторы из органзы
- Как выбрать идеальные шторы для маленькой кухни с балконом