Морфологическое исследование биоптата – это гистология срезов тканей, которые были получены во время оперативного вмешательства или эндоскопии. Данный анализ позволяет определить структуру ткани и иногда причину возникновения заболевания, наличие возбудителя. При корректной интерпретации этого анализа, врач в дальнейшем подбирает эффективное лечение.
Такой вид исследования зачастую имеет решающее значение. Например, пациенты, которые болеют хроническим гастритом, могут быть досконально проверены только посредством определения морфологической структуры биоптата. Метод диагностики позволяет диагностировать предраковое состояние и наличие иных серьезных заболеваний на ранних стадиях.
Алгоритм проведения морфологического исследования биоптатов
Гистологическое исследование проводится с помощью светового микроскопа с высоким разрешением. Лаборант выполняет необходимую подготовку препарата, включая обезвоживание и заливку образца в парафиновые блоки. Далее с помощью микротома (инструмента для приготовления срезов биологических тканей) лаборант готовит препарат для исследования (толщиной несколько микрометров).
Отделенные ткани размещают на специальном стекле и проводят процедуру специального окрашивания, что позволяет максимально визуализировать отдельные клетки. После того как гистолог получит результаты исследования, он пишет свое заключение, на основании которого лечащий доктор ставит или подтверждает диагноз и назначает соответствующее лечение.
В клинической практике часто проводят срочное морфологическое исследование – когда ткани на гистологию иссекаются в период проведения операции. Срочная диагностика делается в том случае, когда необходимо максимально быстро определить ход хирургического вмешательства. Метод срочной диагностики заключается в мгновенной заморозке тканей (обезвоживание не проводится). После чего происходит стандартная микроскопия клеток. Стоит отметить, что длительность мгновенного исследования составляет не менее получаса.
Еще один вариант проведения МИБ – цитология. Анализ на цитологию подразумевает не иссечение тканей, а забор на исследование клеток, когда для постановки предварительного диагноза не доступен кусочек слизистой оболочки. Данный метод исследования чаще всего используется в гинекологии – мазок слизистых шейки матки. Он назначается для выявления новообразований на ранних стадиях. Стоит отметить, что на практике биопсия намного эффективнее и результативнее, чем цитология.
Показания и противопоказания к проведению исследования
Обычно биопсия назначается пациентам тогда, когда есть подозрение на развитие онкологических заболеваний. Морфологическое исследование биоптатов необходимо при следующих показаниях:
- патология пищеварительного тракта, мягких тканей, забрюшинного пространства, средостения, стенок грудной клетки, плевральной полости легких, гематомы;
- «холодный» узел или киста щитовидной железы;
- злокачественное новообразование;
- опухоли неизвестной этиологии в области надпочечников;
- абсцесс и очаговые поражения селезенки;
- патологии печени.
Морфологическое исследование биоптатов противопоказано при:
- наличии угрозы прерывания беременности;
- подозрении на меланому;
- отказе пациента в письменном виде на проведение процедуры;
- наличии возможности провести диагностическое исследование неинвазивного типа;
- нарушении свертывания крови тяжелой формы.
Стоит отметить, что в период забора тканей для проведения МИБ могут возникнуть осложнения: воздушная эмболия, рассеивание опухоли и, в редких случаях, летальный исход.
Способы взятия образцов биоптата
Самым малотравматичным способом исследования на сегодняшний день считается пункционная аспирационная биопсия. Для ее проведения выполняют чрескожный прокол полой иглой, через которую и осуществляется забор тканей из патологического очага. Чаще всего данный вид забора тканей происходит под контролем УЗИ. Среди недостатков такого метода стоит отметить: отсутствие стопроцентной гарантии точного попадания в патологический очаг, для исследования может не хватить отобранного материала.
Толстоигольная трепан-биопсия – используются специальные иглы с резьбой. В исследуемые ткани они как-бы ввинчиваются и резко выдергиваются.
Инцизионная биопсия – это вид иссечения тканей, который проводится в ходе хирургического вмешательства. Стоит отметить, что процедура происходит не с лечебными, а исключительно с диагностическими целями. Хирург видит патогенный очаг и выполняет иссечение биоптата для анализа с нескольких участков.
Эксцизионная биопсия – проводится в условиях хирургического вмешательства и предусматривает полное удаление новообразования или поврежденного органа.
Читайте также: При газообмене в тканях углекислый газ движется
Подготовка к проведению забора биоптата
Для того, чтобы полученные материалы были пригодны к диагностике, пациенту рекомендуют: перед процедурой как минимум три дня не употреблять алкогольные напитки, за неделю отказаться от острой и кислой пищи. Проведение биопсии ЖКТ проводится полностью на голодный желудок. Важно предупредить доктора о приеме каких-либо препаратов.
Чаще всего забор биоптата проходит под местной анестезией, следовательно, если у пациента есть нарушения деятельности ЦНС, ему предлагают принять седативное средство. Длительность процедуры займет от нескольких минут до часа, все напрямую зависит от локализации патологического очага.
Результат морфологического исследования биоптата покажет наличие воспалительного и инфекционного патогена, а также тип новообразования и т.д. Результаты передаются непосредственно лечащему доктору (он указан в направлении), или же их может забрать пациент (обычно на следующие сутки). Важно, помнить, что своевременная диагностика поможет максимально быстро и эффективно выявить и лечить патологию.
- Коржевский Д. Э., Гилерович Е. Г., Кирик О. В., Сухорукова Е. Г. – Морфологическая диагностика. Подготовка материала для гистологического исследования и электронной микроскопии: руководство / под ред. Д. Э. Коржевского. – СПб: СпецЛит, 2013. – 127 с.
Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru
Специальность: инфекционист, гастроэнтеролог, пульмонолог .
Общий стаж: 35 лет .
Образование: 1975-1982, 1ММИ, сан-гиг, высшая квалификация, врач-инфекционист .
Специальность: Онкология .
В качестве препаратов для морфологической оценки тканей применяют все кроме
Методы исследования в гистологии включают приготовление гистологических препаратов и их изучение с помощью световых или электронных микроскопов. Гистологические препараты представляют собой мазки, отпечатки органов, пленочные препараты, тонкие срезы кусочков органов, окрашенные тем или иным красителем (исследуются также нативные — неокрашенные срезы), помещенные на предметное стекло, заключенные в бальзам и покрытые тонким покровным стеклом.
Для изготовления гистологического препарата необходимо после взятия материала произвести его фиксацию в том или ином фиксаторе (формалине, спирте, а для электронной микроскопии — в глутаровом альдегиде и четырехокиси осмия). Делается это для предотвращения процессов аутолиза и сохранения структуры органа, близкой к прижизненной. Далее следуют этапы обезвоживания кусочка органа в спиртах возрастающей концентрации и в ксилоле с целью уплотнения тканей, что необходимо для изготовления тонких срезов. Для придания кусочку органа еще большей плотности и гомогенности, обеспечивающей высококачественную резку, проводят его заливку в органическую среду — парафин, целлоидин (для световой микроскопии) и органические смолы (эпон, аралдит, дуркупан) — для электронно-микроскопического исследования.
Существуют также физические способы фиксации материала, наиболее распространенным из которых является быстрое замораживание кусочка органа с помощью жидко.го азота и других средств. Для резки замороженного материала используют специальные приборы — криостаты, или замораживающие микротомы.
Толщина срезов, предназначенных для световой микроскопии, не должна превышать 4-5 мкм, для электронной — 50-60 нм (такие ультратонкие срезы изготавливают на специальном приборе ультратоме, используя стеклянные или алмазные ножи и автоматический режим резки).
После получения срезов их помещают на предметные стекла, далее следуют этапы освобождения срезов от заливочной среды (при световой микроскопии) и окраски для придания срезам контрастности. Среди гистологических красителей наиболее часто употребляется сочетание гематоксилина, маркирующего ядро (кислотные молекулы), и эозина, избирательно окрашивающего белковые молекулы (цитоплазматический краситель).
По окончании окрашивания срезы заключают в консервирующие среды (канадский, кедровый бальзамы) и накрываются покровным стеклом.
Основным методом гистологического исследования клеток, тканей и органов является световая микроскопия. В световом микроскопе для освещения объекта используются лучи видимого спектра. Современные световые микроскопы позволяют получать разрешение порядка 0,2 мкм (разрешающая способность микроскопа — это то наименьшее расстояние, при котором две рядом расположенные точки видны как отдельные). Разновидности световой микроскопии — фазово-контрастная, интерференционная, поляризационная, темнопольная и др.
Читайте также: Как сшить юбку из квадрата ткани
Фазово-контрастная микроскопия — метод изучения клеток в световом микроскопе, снабженном фазово-контрастным устройством. Благодаря смещению фаз световых волн в микроскопе такой конструкции повышается контрастность структур исследуемого объекта, что позволяет изучать живые клетки.
Интерференционная микроскопия. В интерференционном микроскопе падающие на объект световые пучки раздваиваются — один пучок проходит через объект, другой — идет мимо. При последующем воссоединении пучков возникает интерференционное изображение объекта. По сдвигу фаз одного пучка относительно другого можно судить о концентрациях различных веществ в исследуемом объекте.
Поляризационная микроскопия. В микроскопах этого типа световой пучок разлагается на два луча, поляризованных во взаимно перпендикулярных плоскостях. Проходя через структуры ткани со строгой ориентацией молекул, лучи запаздывают друг относительно друга вследствие неодинакового их преломления. Возникающий при этом сдвиг фаз является показателем двойного лучепреломления клеточных структур (таким способом были исследованы, например, миофибриллы).
Морфологическая верификация опухолей
Основная задача морфологической диагностики — установить тканевую принадлежность опухоли (гистогенез), при этом тщательно оценивается степень атипии самой клетки и нарушение тканевых структур. В большинстве случаев диагноз устанавливается по традиционно приготовленным препаратам, изучаемым при световой микроскопии. Для морфологического исследования используются различные методы забора материала:
— Соскобы и мазки-отпечатки. Являются распространенным способом диагностики поверхностных изъязвленных опухолей.
— Пункция. Выполняется при поверхностно расположенных узловых образованиях. При малых размерах подозрительных в отношении опухолевого роста образований возможно выполнение пункции под контролем УЗИ. В неясных случаях прибегают к проведению иммуногистохимических , электронно-микроскопических исследований , иногда выявляющих дополнительные морфологические признаки, позволяющие сопоставить опухоль с исходной тканью.В настоящее время при обнаружении опухоли внутренних органов возможно осуществить морфологическое исследование практически в любой части тела.
— Биопсия с забором участка ткани (браш-биопсия). Если пункцию выполнить невозможно, используют эндоскопические методы исследования: фаринго- и ларингоскопию, эзофагогастродуоденоскопию, торакоскопию, бронхоскопию, колоноскопию и др., в ходе которых под визуальным контролем обычно забирают участок ткани (биоптат или браш-биоптат — соскоб специальной щеточкой, смывы с поверхности образования и т.д.) для морфологического исследования.
— Открытая биопсия. Открытая биопсия опухоли выполняется, как правило, после неудачных попыток верифицировать диагноз вышеуказанными методами или из-за необходимости получить больше ткани для выполнения некоторых специфических исследований, например для определения рецепторов гормонов при опухолях молочной железы, иммуногистохимического исследования при гематосаркомах. Биопсия инцизионная предполагает получение участка ткани непосредственно из патологического очага, выполняется под местной анестезией (из опухоли молочной железы, мягких тканей) или под наркозом (из костных опухолей). Биопсия эксцизионная выполняется как хирургическое вмешательство с удалением опухоли в пределах здоровых тканей. Трепанобиопсия в основном используется для исследования новообразований молочной железы, костей, мягкотканных опухолей. При невозможности верифицировать злокачественность опухоли на диагностическом этапе планируют срочное гистологическое исследование во время операции.Эти способы обычно дают достаточно материала для морфологической верификации диагноза. Наиболее информативный материал получают из участков опухоли на границе со здоровой тканью.
— Трепан-биопсия. Гистологическая верификация может быть получена при использовании специальной иглы или трепана, при этом изымается столбик измененной ткани, пригодный для гистологического исследования. Особенно важным в плане адекватной диагностики распространенности опухолей бывает исследование сомнительных по клиническим данным образований в зонах регионарного метастазирования. В большинстве же случаев сопоставление клинических проявлений опухоли с ее симптомами вне основного очага не требует верификации всех обнаруженных метастазов. Производят морфологическое исследование наиболее доступных вторичных опухолей, что само по себе делает ясным представление об истинной распространенности заболевания. Верификация диагноза осуществляется путем чрезкожной пункции метастаза или забора материала при лапаро- или торакоскопии.
Что такое морфологическое подтверждение
В этом материале мы постараемся популярным языком, доступным не только онкологу или патологу, рассказать о верификации (подтверждении) онкологического диагноза с помощью гистологического и иммуногистохимического исследования.
Читайте также: Остеогенный дифферон костной ткани
Сначала разберемся с терминологией. Морфологическим исследованием в медицине называют исследование структуры тканей, выполненное различными способами.
Морфологическое исследование для подтверждения онкологического диагноза — это обязательный компонент в диагностике рака. Постановлением Всемирной организации здравоохранения любой онкологический диагноз должен быть подтвержден морфологическим исследованием, так как это единственный 100% способ определить злокачественность или доброкачественность новообразования и определить подвид новообразования. В связи с этим онколог после первичной диагностики и оценки клинической картины должен направить пациента на биопсию для дальнейшего проведения гистологического и иммуногистохимического исследования. Однако существуют случаи (при определенной нозологии и локализации опухоли), когда забор биопсийного материала может ухудшить общую картину. В таких случаях забор материала осуществляется непосредственно во время операции по удалению новообразования.
Теперь перейдем непосредственно к видам морфологических исследований — гистологическим и иммуногистохимическим исследованиям материала при постановке онкологического диагноза. Эти исследования в современной медицине представляют из себя высокоавтоматизированные и высокотехнологичные медицинские услуги. Если говорить простым языком о механизме проведения исследования, то оно состоит из нескольких этапов:
· Первичная визуальная оценка врачом-патологом биопсийного материала, вырезка отдельных участков для проведения исследования
· Проводка материала (процесс специальной подготовки биопсийного материала, в результате которого получается гистологический (парафиновый) блок)
· Микротомирование (процесс обработки блока на микротоме и нарезки из него пластин биопсийного материала толщиной около 1 микрона)
· Окраска гистологических препаратов в процессоре (иммуногистостейнере)
· Микроскопия (изучение гистологических препаратов под электронным микроскопом)
Важно отметить, что врач-патоморфолог должен обладать энциклопедическими знаниями и большим опытом, основанном на объеме проведенных исследований и изучении опыта коллег.
Большую часть выше описанных процессов можно и нужно автоматизировать. Современная патоморфологическая лаборатория должна напоминать высокотехнологичное производство. Такой подход позволяет добиться не только высокой производительности работы лаборатории, но и повышения качества каждой технологической операции, а также страховки от человеческих ошибок.
Гистологическое исследование позволяет определить злокачественность или доброкачественность новообразования. Иммуногистохимическое исследование позволяет дифференцировать подвид опухоли и назначить правильное лечение. Успех химиотерапии, к примеру, напрямую зависит от качества проведения гистологических исследований.
К сожалению, общая ситуация с гистологическими (иммуногистохимическими) исследованиями в России не слишком хорошая. В большинстве лабораторий не хватает высокотехнологичного оборудования, реактивов, но, самое главное, — опытных врачей. Так, процент корректировки диагнозов по материалам, поступившим на консультацию в лабораторию составляет от 10 до 60%. Это означает, что в среднем в трети случаев неправильно верифицируется тип рака.
Отдельно нужно сказать о пересмотре готовых гистологических препаратов(стекол). Эта практика является достаточно распространённой, но, к сожалению, не дающей гарантий консультацией. Дело в том, что врач-патоморфолог, оценивая готовое стекло, не может повлиять на процедуру приготовления этого стекла(достаточно сложную и высокотехнологичную, как было написано выше). Поэтому единственным способом гарантированной консультации гистологических препаратов на сегодняшний день является проведение повторного исследования на основе гистологических(парафиновых) блоков.
Резюмируя вышесказанное, можно отметить, что морфологическая верификация является важнейшим методом подтверждения онкологического диагноза и основой для назначения лечения. Без проведения гистологических(иммуногистохимических) исследований невозможно со 100% уверенностью ставить диагноз в подавляющем большинстве случаев. К сожалению, лабораторий, имеющих возможность проводить точную и срочную гистологическую диагностику, очень и очень мало. Сроки проведения иммуногистохимических исследований в среднем в России составляют 15-20 дней, что непозволительно долго. Для сравнения, автоматизированная лаборатория Unim проводит ИГХ-исследования в среднем за 3-4 дня.
Стоимость и срок исследования
* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.
По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87