Анализ кариотипа: исследование, нужное всем будущим родителям
Примерно в 15% пар, столкнувшихся с репродуктивными проблемами, один из супругов является носителем сбалансированной хромосомной перестройки. Например, транслокационная форма синдрома Дауна может передаться ребенку от родителя с объединенными 14 и 21 хромосомами. В норме у человека две 14 и две 21 хромосомы. Если одна 21 хромосома прикреплена к 14, то количество хромосомного материала не увеличивается, а у носителя такой хромосомы нет никаких признаков перестройки. При зачатии ребенка в его геном попадает по одной хромосоме от матери и отца. В нашем примере к ребенку может попасть: обычная 14 хромосома и одна 14, объединенная с 21, и еще по одной отдельной 21 хромосоме от мамы и папы. Таким образом, у ребенка будет две 14 и три 21 хромосомы, а трисомия по 21 хромосоме является причиной синдрома Дауна.
Такие же ситуации могут возникать и с другими хромосомами. Поэтому всем супругам на этапе планирования беременности лучше сделать исследование кариотипа даже при отсутствии показаний. Важно! чтобы были обследованы оба будущих родителя, потому что каждый из них может являться носителем.
Что такое анализ кариотипа?
Исследование кариотипа (стандартное цитогенетическое исследование) – это анализ числа и структуры хромосом с использованием микроскопа.
Вернемся к основам: в каждой клетке нашего организма содержится генетический материал, представленный хромосомами. Во время деления клеток, в стадии метафазы, хромосомы можно рассмотреть под микроскопом с увеличением в 1000 раз.
Материалом для цитогенетического исследования, являются лимфоциты, потому что забор крови это безопасная процедура, с которой знаком каждый человек, а лимфоциты – это клетки крови, которые сохраняют высокую способность к делению в течение всей жизни.
Кому показано исследование?
• Парам, планирующим рождение ребенка.
• Семьям, которые столкнулись с проблемой бесплодия.
• Семьям, которые пережили антенатальную или раннюю постнатальную гибель ребенка в анамнезе.
• Семьям, в которых есть ребенок с пороками развития.
• Донорам сперматозоидов и яйцеклеток.
• Женщинам с аменореей (отсутствие менструации).
• Детям при подозрении на хромосомную патологию.
Ограничением для исследования являются некоторые онкологические заболевания, поскольку опухолевые клетки могут циркулировать в крови, а их кариотип часто отличается от нормального, поэтому результат анализа может быть недостоверным. Также при онкологических заболеваниях крови может меняться кариотип лимфоцитов. Кроме того, ограничением к использованию метода будут инфекционные заболевания. Инфекционные агенты влияют на лимфоциты и могут снижать их митотическую активность, например, при инфекционном мононуклеозе меняется структура лимфоцитов.
Как проходит исследование?
Перед исследованием можно перекусить, это не повлияет на результат, но следует исключить прием алкоголя за два дня до сдачи анализа. После приема алкоголя кровь становится более густой и быстрее сворачивается, что может повлиять на качество процедуры забора.
Медсестра берет 2 мл венозной крови в специальную пробирку и доставляет в лабораторию.
В лаборатории из крови выделяют лимфоциты и помещают в питательную среду, чтобы стимулировать их деление, а через 72 часа, когда клетки будут находиться в стадии метафазы, добавляют реактив, останавливающий деление.
Далее клетки обрабатывают гипотоническим раствором, для того чтобы их мембрана лопнула, и хромосомы, расположенные в виде метафазных пластин, вышли из клеток.
Полученную взвесь клеток и метафазных пластин раскапывают на предметное стекло и окрашивают специальным красителем.
Далее врач – лабораторный генетик будет заниматься анализом кариотипа. Как правило, цитогенетик выбирает 11 самых информативных метафазных пластин и анализирует структуру каждой хромосомы под микроскопом и на экране монитора с применением специальных программ обработки изображений.
При подозрении на хромосомную патологию или мозаицизм (наличие в тканях одного организма генетически различающихся клеток) врачу необходимо проанализировать большее количество материала, обычно от 20 метафазных пластин, для подсчета процента клеток с отличающимся кариотипом и постановки точного диагноза.
Читайте также: Ткань шотландка фланель это
Результат будет готов через 8 – 21 день. Длительность исследования связана с особенностями методики, каждый из описанных выше этапов исследования занимает от одного до трех дней. Если результат не готов в течение 14 дней, не стоит переживать, возможно, это связано с загруженностью лаборатории.
О чем говорят результаты исследования?
Результаты анализа поможет прочитать врач-генетик, но кое-какую информацию из заключения вы сможете понять сами. Например, вы можете обратить внимание на следующие параметры
• 46 – это нормальное количество хромосом: 22 пары аутосом – хромосом, одинаковых у мужчин и женщин, и одна пара половых хромосом. Изменение количества аутосом приводит к летальным мутациям, кроме трисомии по 21 хромосоме, в результате которой развивается сидром Дауна.
• хромосомы X и Y определяют пол, ХХ – женский, ХY – мужской. Изменение количества половых хромосом вызывают нарушения формирования половых признаков. Например, при синдроме Шерешевского-Тернера у женщины одна X хромосома вместо пары, а при синдроме Клайнфельтера набор половых хромосом может выглядеть как XXY.
• [11] цифра в квадратных скобках – число проанализированных метафазных пластин: чем больше цифра – тем достовернее результат. Как правило, цитогенетик анализирует 11 – 15 метафазных пластин.
Обнаружение у будущих родителей хромосомных перестроек не является причиной для отказа от рождения ребенка, главное своевременно обратиться за помощью к врачам для выбора репродуктивной тактики.
О плюсах и минусах метода
+ Возможность выявления сбалансированных хромосомных перестроек.
+ Стандартное цитогенетическое исследование входит в услуги ОМС и является бесплатным для детей с патологиями развития и пар с репродуктивными проблемами.
+ Средняя стоимость анализа в частных клиниках составляет 5000 рублей, что значительно дешевле других методов исследования генетического материала.
+ Исследование кариотипа можно выполнить в любом возрасте, а результат будет действителен всю жизнь.
+ Это безопасный тест, не имеющий противопоказаний.
— Цитогенетический метод позволяет выявить только грубые хромосомные перестройки, нормальный результат исследования не говорит о полном отсутствии любых генетических патологий.
— Это субъективный метод и результат исследования во многом зависит от опыта и квалификации врача-цитогенетика.
Стандартное цитогенетическое исследование должно стать первым шагом на этапе планирования беременности. Результат этого исследования, свидетельствующий о низком риске рождения ребенка с хромосомными патологиями, снизит и тревожность, которая не принесет пользы будущим родителям.
Мозаицизм
Мозаицизм — наличие в тканях одного организма генетически различающихся клеток, происходящих от одной зиготы
Очень важно не путать мозаицизм с другим явлением раннего онтогенеза — химеризмом. Химеризм — наличие в тканях генетически различающихся клеток, происходящих от двух и более зигот.
Как проявляется мозаицизм?
Мозаицизм в клинической практике описывался для различных хромосомных заболеваний с середины прошлого века. Он проявляется наличием анеуплоидии (например, трисомии по 21 хромосоме, синдром Дауна) не во всех клетках исследуемой ткани (чаще всего это лимфоциты периферической крови, клетки буккального эпителия); причем для постановки диагноза необходимо более 10% анеуплоидных клеток в исследуемом образце. Известно, что мозаичная форма любого синдрома имеет более сглаженную клиническую картину и зависит от того, на каком этапе и в какую ткань попал анеуплоидный клон клеток в процессе развития. Было показано, что мозаицизм может затрагивать как сам эмбрион, так и внезародышевые ткани. Например, описано немало случаев рождения здоровых детей, для которых мозаицизм был обнаружен исключительно в плаценте.
Виды мозаицизма
Мозаицизм возникает вследствие нерасхождения или утраты хромосом в гаметогенезе или на разных стадиях эмбриогенеза. При этом термин «нерасхождение» относится к любым нарушениям разделения хроматид или гомологичных хромосом в мейозе или в митозе, которые приводят к численным аномалиям кариотипа. О хромосомном мозаицизме говорят, когда два (или более) клона клеток содержат разное количество хромосом; генным мозаицизмом называют наличие мутации (или нескольких) в патологических клонах клеток. В зависимости от того, на какой стадии развития эмбриона образовался патологический клон клеток, соотношение клеток с нормальным и аномальным кариотипами может отличаться в разных тканях. Если патологический клон представлен во всех тканях организма, говорят о так называемом истинном или генерализованном мозаицизме ; если этот патологический клон ограничен клетками одной ткани, говорят об ограниченном мозаицизме .
Читайте также: Что можно сшить из зеленой ткани игрушки
Теоретически, возникнуть мозаицизм может на любом этапе развития организма. Однако считается, что механизмы контроля митоза включаются вместе с работой генома эмбриона, то есть ближе к 4 дню развития. Именно поэтому очень высокий уровень мозаицизма наблюдается в эмбрионах 2 и 3 дней развития — после первых нескольких . Часто мозаицизм в том или ином соотношении сохраняется и на стадии бластоцисты, но уровень его значительно снижается. Тем не менее, наличие мозаицизма может говорить о том, что эмбрион попадает в группу риска и информация об уровне мозаицизма (соотношение патологического и эуплоидного клонов клеток в исследуемом образце) по результатам ПГТ может носить прогностический характер с точки зрения очередности выбора эмбриона на перенос.
Подводя итог, можно сказать, что в контексте ПГТ эмбрионов ранней стадии развития нам интересен именно хромосомный мозаицизм, а также вовлеченность в мозаицизм определенных хромосом. Эти данные помогают нам сделать выбор в пользу переноса эмбриона без мозаицизма или с низким его уровнем и спрогнозировать эффективность переноса.
Если у вас есть дополнительные вопросы о мозаицизме, запишитесь на консультацию к специалистам GMS ЭКО, оставив заявку по телефону или на сайте.
ДНК-анализ на хромосомные аномалии абортивного материала
От 15 до 20% клинически диагностированных беременностей заканчиваются потерей. Потеря беременности может повлечь серьезные психологические последствия для родителей, поэтому особенно важно понять, почему она произошла. Одной из ведущих причин остановки развития беременности являются хромосомные аномалии плода.
В клинике Euromed In Vitro для выяснения причины невынашивания применяют ДНК-анализ на хромосомные аномалии абортивного материала (исследование молекулярного кариотипа) для выявления и исключения генетической причины потери ребенка.
Сочетание методов NGS+ПЦР (полногеномного секвенирования + полимеразной цепной реакции), которыми мы проводим исследование, позволяет изучить абортированный материал на весь известный спектр хромосомных аномалий. Главным преимуществом данного исследования является высокая разрешающая способность по сравнению со стандартным цитогенетическим исследованием.
Мы рекомендуем провести исследование молекулярного кариотипа материала, если вы столкнулись с:
- любыми случаями невынашивания (в том числе и привычное невынашивание, когда в анамнезе уже имеются два и более эпизода самопроизвольного выкидыша или замершей беременности) для выяснения возможной генетической причины;
- прерыванием беременности по медицинским показаниям (например, пороки развития плода);
- антенатальной гибелью плода (с врожденными пороками развития и без них);
- замершей (неразвивающейся) беременностью после ЭКО без проведенного преимплантационного генетического тестирования (ПГТ) на анеуплоидию;
- либо в качестве более эффективной альтернативы стандартному кариотипированию. Разрешающая способность ДНК — теста на хромосомные аномалии намного выше стандартного цитогенетического исследования, а стало быть, будет получено и значительно больше информации о генетическом статусе погибшего плода.
Результаты исследования позволяют врачу подготовить индивидуальные рекомендации для каждого конкретного случая, а также:
- выбрать тактику обследования с учетом индивидуальной ситуации;
- определить репродуктивные риски на будущее;
- проконсультировать по методам профилактики хромосомных аномалий и снижению рисков их возникновения;
- выявить причину потери и помочь пациентам психологически принять ситуацию, в случае если эмбрион был нежизнеспособен и потеря была предопределена.
В процессе исследования молекулярного кариотипа специалисты лаборатории изучают образцы абортивного материала, из которого выделяется плодная ДНК (ворсины хориона, плодное яйцо, оболочки и ткани плода). Также перед исследованием осуществляется забор крови матери для контроля контаминации («загрязнения») плодного материала клетками матери.
Суть исследования заключается в оценке кариотипа погибшего плода на предмет отклонений в его хромосомном материале.
Читайте также: Ткань для мойки полов
Сочетание методов NGS+ПЦР, которые используются в нашей клинике, позволяют выявлять широкий спектр хромосомных аномалий:
- анеуплоидии — наличие непарных хромосом (моносомии или трисомии). Примерами трисомий являются синдромы Дауна, Эдвардса, Патау, моносомий — синдром Шерешевского-Тернера;
- мозаицизм — наличие в тканях одного организма генетически различающихся клеток, происходящих от одной зиготы, приводящих к возникновению тяжелых врожденных заболеваний;
- делеции/дупликации — сегментарные нарушения, которые приводят к потере или удвоению хромосомного материала;
- мозаичные сегментарные нарушения;
- триплоидии — дополнительный набор хромосом, чаще всего приводящий к раннему выкидышу.
Исследование с помощью метода NGS+ПЦР, который мы используем в Euromed In Vitro, является самым информативным в настоящее время и обладает рядом преимуществ перед другими методами (такими как FISH, ПЦР). А именно:
- Низкий риск неполучения результата (менее 5%) – нет необходимости культивирования живых клеток как при стандартном кариотипировании, при котором риск неполучения результата до 30%;
- Получение результата по всем хромосомам — в отличие от анализа на ограниченное число хромосом методами ПЦР или FISH, которые применяются в случае неполучения результата стандартным кариотипированием;
- Выявление плацентарного мозаицизма – в отличие от прямого анализа кариотипа по отдельным метафазам или использования отдельно методов ПЦР/FISH, при которых есть риск пропуска мозаичной патологии;
- В отличие от отдельного использования метода NGS, комбинация с методом ПЦР позволяет не пропустить триплоидии;
- При исследовании проводится анализ крови матери на предмет контаминации плодного материала клетками матери, что исключает ложноотрицательные результаты.
Установить причины невынашивания и подготовить рекомендации родителям, чтобы снизить риск потери следующей беременности — самая важная задача исследования, поэтому наша клиника сотрудничает с Medical Genomics – единственной генетической лабораторией в России, которая прошла международную программу внешней оценки качества (ВОК), проводимой авторитетными независимыми организациями UK NEQAS и CEQAS.
Исследование проводится на любых сроках беременности. Забор плодного материала производится в ходе гистероскопии.
- Стоимость ДНК-анализа на хромосомные аномалии абортивного материала (при потере беременности) — 15 500 руб.
- Срок получения результатов исследования — до 14 дней.
Врачи Euromed In Vitro сделают все максимально возможное, чтобы в вашей семье появился здоровый малыш.
Запишитесь на консультацию к гинекологу по тел: + 7 812 327 03 01
Отзывы пациенток об ЭКО по ОМС в Euromed In Vitro
У Ольги Валерьевны я наблюдаюсь и прохожу лечение уже довольно давно. Из качеств могу выделить высокий профессионализм и доступное разъяснение назначаемого лечения. По завершению приема врач дала полезные рекомендации и направила на дальнейшее лечение. Всем кому потребуется специалист в этом направлении очень его рекомендую.
Ответ клиники:
Здравствуйте! Спасибо Вам за развёрнутый отзыв о работе Ольги Валерьевны. Благодарим за рекомендацию. Рады, что Вы высоко оценили её профессиональные и личные качества.
Большое спасибо Лекаревой Татьяне Михайловне. На протяжении многих лет хочу на прием. Получаю нужную мне информацию, а также дополнительные рекомендации, которые очень важны для меня. С искренним уважением я желаю Татьяне Михайловне успехов и здоровья.
Ответ клиники:
Юлия, здравствуйте! Спасибо Вам за доверие и тёплый отзыв. Выши слова мы передали Татьяне Михайловне. Желаем Вам крепкого здоровья!
- Свежие записи
- Балкон в многоквартирном доме: является ли он общедомовым имуществом?
- Штраф за остекление балкона в 2022: что это и как избежать наказания
- Штраф за мусор с балкона: сколько заплатить за выбрасывание окурков
- Оформление балконного окна: выбираем шторы из органзы
- Как выбрать идеальные шторы для маленькой кухни с балконом